ارزيابي بيان ژن WT1 به عنوان شاخصي براي بررسي حداقل بيماري باقيمانده در مبتلايان به AML

Assessment of Wilms tumor gene (WT1) in acute myeloid leukemia patients as a new marker to detect Minimal Residual Disease (MRD

سابقه و هدف ژن WT1 يك فاكتور نسخه‌برداري را كدگذاري مي‌كند كه در تمايز و تكثير سلول‌هاي پيش ساز هماتوپوئتيك نقش دارد. اين ژن در بافت‌هاي خاصي مانند كليه، تخمدان و قلب نيز بيان مي‌شود. ارزيابي كمي بيان ژن WT1 مي‌تواند پارامتر مفيد و كارآمدي براي بررسي حداقل بيماري باقيمانده( MRD ) در لوكمي‌ها باشد. مواد وروش‌ها مقدار نسبي بيان ژن WT1 در خون محيطي 62 بيمار مبتلا به AML با استفاده از روش Real time Quantitative بررسي شد. همه اين بيماران تازه تشخيص (new case) بودند و با توجه به در دسترس بودن‌ يا نبودن بيماران، پي‌گيري تا حدود 3 سال انجام شد. اين مطالعه از نوع بنيادي و كاربردي بود، به صورت مقطعي انجام شد و نحوه نمونه‌برداري از نوع تصادفي و از بين مبتلايان به لوكمي حاد ميلوئيدي بر اساس معيارهاي تشخيصي اوليه از سوي بخش باليني بود. ميزان بيان WT1 در آن‌ها با ميزان بيان WT1 در خون محيطي 24 فرد سالم مقايسه شد(ميزان بيان WT1 در سلول‌هاي K562 معادل ^6^10 در نظر گرفته شد). يافته‌ها مقادير قابل توجهي از بيان ژن WT1 در نمونه‌هاي زمان تشخيص در لوكمي‌هاي حاد(بيش از 80% موارد) ملاحظه شد. با انجام شيمي درماني، بيان WT1 كاهش يافت(در زمان درمان القايي حدود 2-1 لگاريتم و در زمان درمان تحكيمي حدود 4-3 لگاريتم). همبستگي واضحي بين مقادير نسبي بيان ژن WT1 (كمتر از ناحيه خاكستري در مقابل بيشتر از ناحيه خاكستري) و پيش آگهي احتمال وقوع عود در موارد AML مشاهده شد. بيماراني كه در پي‌گيري‌هاي متعدد ميزان بيان WT1 در آن‌ها كمتر از ناحيه خاكستري باقي ماند، از بهبودي كلينيكي بالاتري بهره‌مند بودند. در حالي‌كه 6 مورد از بيماران كه در نهايت مبتلا به عود شدند، ميزان بيان WT1 در آن‌ها حدود 6-1 ماه قبل از بروز عود باليني از ناحيه خاكستري فراتر رفت. نتيجه گيري WT1 يك فاكتور مولكولي مفيد و كارآمد براي تشخيص حداقل بيماري باقيمانده، ارزيابي تاثير درمان و پيش‌بيني عود در مبتلايان به AML است.

Background and Objectives WT1 gene encodes a transcription factor that is involved in differentiation and proliferation of hematopoietic precursor cells as well as some other tissues like kidney, ovary, heart, etc. Quantitative assessment of WT1 gene expression is proposed as a useful marker in MRD detection and leukemia management. Materials and Methods To assess the relevance of this gene, we analysed peripheral blood mononuclear cells of 62 AML patients (new cases) for the expression level of WT1 mRNA using Real-time quantitative RT-PCR. We followed the analysis up to 3 years, depending on patient availability. This study as a fundamental and applicable one was done cross-sectionnaly. Samples were obtained randomly from the AML patients referred to the BMT center, and selection was based on the diagnostic criteria defined by clinical wards. WT1 expression in MNCs of patients was compared with 24 healthy individuals (K562 cells considered to express WT1 gene equivalent to 106). Results Samples for diagnosis showed significantly high levels of WT1 expression (>80%). After chemotherapy, its expression decreased (diminished about 1-2 log within induction therapy and around 3-4 log after consolidation therapy). There was a noticable correlation between the relative expression levels of WT1 and predicition of relapse (lower than gray zone versus higher than). Patients whose WT1 expression levels remained lower than the gray zone benefit from a better compete remission. On the contrary, 1-6 months prior to overt clinical relapse in 6 patients, their WT1 expression raised to levels upper than gray zone. Conclusions This study revealed that WT1 is a useful marker for detecting minimal residual disease, assessing chemotherapy effects, and prediciting relapse in AML patients.