بهينه سازي انتقال ژن به جو و توليد گياهان تراريخته بارور با استفاده از آگروباكتريوم

Optimization of Agrobacterium tumefaciens-mediated Transformation of Barley and Production of Fertile Transgenic Plants

در سال ھاي اخير انتقال ژن به غلات به ابزار مھمي براي بھبود صفات زراعي گياھان تبديل شده است. جو يكي از با اھميت ترين غلات دانه اي است كه اصلاح آن براي افزايش تحمل به تنش ھاي زيستي و غيرزيستي از طريق انتقال ژن ھمانند ساير گياھان زراعي از اھميت زيادي برخوردار است. بھينه سازي عوامل مختلف موثر در تراريزش و باززايي گياھان تراريخته اولين قدم در برنامه ھاي انتقال ژن به گياھان محسوب مي شود. در اين پژوھش برخي عوامل موثر در تراريزش جو به وسيله آگروباكتريوم مانند سويه باكتري، غلظت آگروباكتريوم، مدت زمان ھم كشتي و محيط تلقيح باكتري مورد بررسي قرار گرفت. براي تاييدحضور ژن ھاي انتقالي در گياھان تراريخته احتمالي از آزمون PCR و براي بررسي بيان ژن ھاي انتقالي از آزمون بيان ژن GFP استفاده شد. باززايي ريزنمونه ھاي تراريخته با موفقيت انجام و گياھان تراريخته بارور حاصل گرديد. نتايج نشان داد كه سويه LBA4404 و AGL1 به عنوان موثرترين سويه ھاي آگروباكتريوم و غلظت OD600=1 به عنوان مناسب ترين غلظت در تراريزش ريزنمونه ھاي جنين نارس جو عمل كرده اند. ھمچنين استفاده از محيط تلقيح LB و مدت زمان ھم كشتي دو روزه ريزنمونه ھا با آگروباكتريوم، بيشترين ميزان تراريزش در جو را بدنبال داشت.