بررسي اثر داروي مركاپتوپورين بر بيان ژن DNMTI در كودكان مبتلا به لوسمي لنفوبلاستيك حاد نوع B

The Effect of Mercaptopurine on the DNMT I Gene in Children with B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia

با توجه به بروز بالاي لوسمي لنفوبلاستيك حاد، امروزه اهميت پژوهش در زمينه اين بيماري و يافتن شاخصه هاي ژنتيكي مرتبط با آن بسيار مورد توجه است. نقش بيان ژن DNMT I طي دريافت داروها در بيماران مبتلا به لوسمي النفوبلاستيك حاد نوع B از اهميت به سزايي برخوردار است چرا كه كاهش بيان اين ژن در اين بيماران مي تواند بيانگر اثربخشي داروهاي درماني باشد. بنابراين در اين مطالعه سعي شده است اثر داروي مركاپتوپورين بر بيان ژن DNMT I در كودكان مبتلا به لوسمي لنفوبلاستيك حاد نوع B بررسي شود. مواد و روش ها: اين مطالعه تحليلي در سال 1395 طي نمونه گيري در دسترس (Convenience) روي 8 كودك مبتلا به الوسمي لنفوبلاستيك حاد نوع B در مركز طبي كودكان تهران در دو مرحله قبل و پس از دريافت دارو، و 10 كودك سالم مراجعه كننده به آزمايشگاه مركزي يزد انجام شد. پس از استخراج RNA كلي از هر 8 نمونه، با استفاده از روش qPCR- RT، تكثير ژن هدف انجام گرفت. به صورت همزمان يك ژن housekeeping نيز به عنوان كنترل داخلي بررسي شد (GAPDH). سپس داده هاي بيان ژن توسط آزمون Paired t - test در نرم افزار SPSS مقايسه شد. نتايج: بيان ژن DNMT I در كودكان مبتلا به لوسمي لنفوبلاستيك حاد نوع B تحت تأثير داروي مركاپتوپورين به طور معني داري نسبت به قبل از دريافت دارو در سطح ضريب اطمينان 95 درصد پايين تر بود (0/02=P). نتيجه گيري: يافته هاي بررسي حاضر پيشنهاد مي كند كه احتمالا داروي مركاپتوپورين اثر مهمي را بر تنظيم اين ژن ايجاد مي كند.

Objective: Considering the high incidence of acute lymphoblastic leukemia (ALL), it is necessary to research this illness and determine genetic markers associated with it. The role of DNMT I gene expression during treatment with mercaptopurine drugs in children with B-cell ALL (B-ALL) is important because its changes reflect the effectiveness or ineffectiveness of the drugs. We have investigated the effect of mercaptopurine drugs on DNMT I expression in children with B-ALL. Methods: This analytical study assessed 8 B-ALL children who referred to Tehran Children's Medical Center and 10 healthy children referred to the Yazd Central Laboratory by convenience selection in 2016. Blood samples were obtained before and after treatment, and extraction of total RNA from each sample was performed for realtime qPCR of the target gene (DNMT I). Simultaneously, we evaluated GAPDH, a housekeeping gene. Data from gene expressions were compared by the paired t-test, using SPSS-16 software. Results: DNMT I gene expression was significantly decreased after mercaptopurine administration in children with B-ALL (P<0.02). Conclusion: Our findings suggest that the mercaptopurine drug may affect DNMT I gene regulation. This epigenetic effect may explain the mechanism of drug action, possibly serve as a diagnostic factor, and a means of better monitoring for patients with ALL.