كاربرد ‌PPD‌ در فرمولاسيون واكسن تجاري هپاتيت ‌B‌ به‌منظور تقويت پاسخ‌هاي ‌ايمني سلولي و همورال

Application of PPD in the Formulation of Commercial Hepatitis B Vaccine to Improve Humoral and Cellular Immune Responses

اهداف: واكسيناسيون با آنتي‌ژن سطحي ويروس هپاتيت B در ادجوانت آلوم پيشگيري از عفونت هپاتيت B را به دنبال دارد. مشتق پروتئيني خالص (PPD)، آنتي‌ژن مايكوباكتريايي است كه موجب بلوغ سلول‌هاي دندريتيك مي‌شود. با توجه به نقش سلول‌هاي دندريتيك در القاي پاسخ‌هاي ايمني، هدف مطالعه حاضر بررسي امكان استفاده از PPD در فرمولاسيون واكسن تجاري هپاتيت B به‌منظور تقويت پاسخ‌هاي ايمني سلولي و همورال بود. مواد و روش‌ها: در مطالعه تجربي حاضر، 63 سر موش بالب/ سي ماده اينبرد، به 7 گروه 9 تايي تقسيم شدند. واكسن هپاتيت B با دوزهاي 1 و 10ميكروگرم PPD در سه نوبت به‌ فاصله دو هفته به‌صورت زيرجلدي به گروه‌هاي HBS-ALUM، ALUM+PPD1µg HBS- و HBS-ALUM+PPD10µg و كنترل متناظر تزريق شد. ميزان IgG كلي سرمي و سايتوكاين‌هاي اينترلوكين 4 (IL-4)، اينترفرون گاما (IFN-γ) و نسبت IFN-γ/IL-4 در كشت سلول‌هاي طحالي با الايزا بررسي شد. آناليز آماري با آزمون تحليل واريانس يك‌طرفه و نرم‌افزارGraf pad prism 6.1 انجام شد. يافته‌ها: به‌كارگيري PPD در واكسن HBs تاثيري بر سايتوكاين IFN-γ نداشت اما موجب كاهش IL-4 و افزايش نسبت IFN-γ/IL-4 در مقايسه با واكسن تجاري شد. همچنين به‌كارگيري PPD در واكسن HBs بعد از تزريق اول موجب تقويت پاسخ ايمني همورال شد اما پس از تزريق دوم بي‌اثر بود، به‌طوري كه پس از تزريق سوم، پاسخ آنتي‌بادي نسبت به واكسن تجاري را كاهش داد. نتيجه گيري: وجود PPD در فرمولاسيون واكسن هپاتيت B مي‌تواند پاسخ ايمني را به سمت سلول‌هاي T كمكي 1 (Th1) سوق دهد. تزريق اول موجب تقويت پاسخ آنتي‌بادي مي‌شود اما پس از سه تزريق، سيستم ايمني همورال را سركوب مي‌كند.

Aims Vaccination with the HBs Ag vaccine formulated in the alum adjuvant prevents hepatitis B infection. Adjuvants increase the efficacy of vaccines. Mycobacterium purified protein derivative (PPD) causes dendritic cell maturation. Considering the role of dendritic cells in the induction of immune responses, the aim of present study was to investigate of application of PPD in the formulation of Commercial Hepatitis B vaccine to improve humoral and cellular immune responses. Materials & Methods In this experimental study, 63 balb/C mice of inbred were divided into 7 groups of 9. The Hepatitis B vaccine with doses of 1 and 10μg of PPD was injected subcutaneously into HBS-ALUM, HBS-ALUM+PPD1μg, HBS-ALUM+PPD10μg and proper control groups, three times with two-week intervals. Total IgG in serum samples and IL-4 and IFN-γ cytokines levels and IFN-γ/IL-4 ratio in spleen cell culture were assessed by ELISA method. Statistical analysis was done using one-way analysis of variance by Graf pad prism 6.1 software. Findings Using PPD in the formulation of HBs vaccine had no effect on IFN-γ cytokine levels but reduced IL-4 and also increased the IFN-γ/IL-4 ratio compared to the commercial vaccine. Also PPD application in HBs vaccine after the first injection enhanced the humoral response, but after the second injection was ineffective so that after the third injection reduced the antibody response compared to the commercial vaccine. Conclusion PPD in the formulation of hepatitis B vaccine can lead the immune response pattern to the T helper cells 1 (Th1). The first injection enhances the antibody response but after third injection suppressed humoral immunity system.