القاي فنوتيپ عصبي در سلول‌هاي بنيادي روياني توسط داروي دپرنيل

The Induction of Neural Phenotype in Embryonic Stem (ES) Cells by

مقدمه و هدف: تجارب پيشين نشان داده كه سلول‌هاي بنيادي روياني (ES) تحت شرايط آزمايشگاهي مي‌توانند به نورون و گليا تمايز يابند. اغلب پروتكل‌هاي القا بر اساس حضور نوعي ماده القاكننده، مانند رتينوئيك اسيد (RA) هستند. دپرنيل، نوعي داروي ممانعت‌كننده آنزيم منوآمين اكسيداز Bاست كه براي درمان بيماري پاركينسون مورد استفاده قرار مي‌گيرد. اين دارو به روش‌هاي مختلف از سلول‌هاي عصبي محافظت كرده، ضمن القاي بيان نوروتروفين‌ها باعث رشد زوايد عصبي در اين سلول‌ها مي‌شود. با توجه به اين نكات مي‌توان احتمال داد كه دپرنيل مي‌تواند با تأثير برسلول‌هاي بنيادي روياني پر استعدادي، آن‌ها را به سلول‌هاي عصبي تبديل كند. در اين پژوهش، تأثير اين دارو بر تمايز سلول‌هاي ES به سلول‌هاي عصبي مورد بررسي قرار گرفته است. مواد و روش‌ها: دستجات سلولي (اجسام شبه جنيني) نوعي دودمان سلول بنيادي روياني (CCE) پس از تشكيل، در معرض غلظت 10 به توان 8- مولار دپرنيل قرار داده شدند. سپس با استفاده از روش‌هاي بررسي مورفولوژيكي و ايمنوهيستوشيمي، تمايز سلول‌هاي CCE مورد ارزيابي قرار گرفت. در بخش بررسي مورفولوژيكي از رنگ‌آميزي اختصاصي كرزيل ويوله استفاده شد و در بخش ايمنوهيستوشيمي، آنتي‌بادي ضد نستين براي تشخيص تمايز نورواپي تليالي و آنتي‌بادي‌هاي ضد سيناپتوفيزين و ضد تيروزين هيدروكسيلاز براي تشخيص فنوتيپ عصبي مورد استفاده قرار گرفتند. نتيجه‌گيري: نتايج اين پژوهش نشان داد كه دپرنيل در غلظت 10 به توان 8- مولار قادر به القاي تمايز عصبي در سلول‌هاي بنيادي روياني است.

Introduction & Objective:: Previous studies have shown that ES cells could be induced to differentiate into neurons and gelia in vitro. Induction protocols are based on culture in the presence of an inducer such as RA. In this study, the effect of deprenyl on the differentiation of embryonic stem cells (ES) cells to neuron-like cells was investigated. Deprenyl is a type B monoamine oxidase inhibitor which has been used for treatment of Parkinson s disease. The drug protects neurons in a variety of modes, by inducing neurotrophin expression, it causes neuritis outgrowth. These raised the possibility of a direct effect of deprenyl on pleuripotent ES to develop into neurons. Materials & Methods: Cells of an embryonic stem cell line (CCE) were cultured as aggregates (embryoid bodies) then, they were exposed to a concentration of 10(-8) M deprenyl. CCE, was used to evaluate the induction of neuronal differentiation by deprenyl. Morphological and immunohistochemical techniques were used to evaluate the differentiation of CCE cells In addition to the Cresyl violet used for morphological study, antinestin antibody was applied to characterize the neuroepithelial differentiation. Moreover, anti-synaptophysin and anti-tyrosine hydroxylase antibodies were used to characterize the neuronal phenotype of ESCs. Results: The results indicated that the concentration of 10(-8) M deprenyl could induce the differentiation of ESCs into neurons