استفاده از لام كوت شده تيموس گوساله جهت تشخيص آنتي‌بادي ضدهسته در سرم بيماران مبتلا‌به بيماري لوپوس

آزمون آنتي‌بادي ضدهسته‌اي رايج‌ترين روش جهت شناسايي بيماران مبتلا‌به لوپوس مي‌باشد كه متأسفانه به‌دليل انحصاري بودن آن واردات آن به كشور سخت و هزينه‌بر است. هدف از مطالعه حاضر استفاده از لام كوت شده تيموس گوساله جهت تشخيص لوپوس بود. مواد و روش‌ها: تعداد 48 نمونه سرم (25 منفي و 23 مثبت) اخذ شده از بيماران مظنون به لوپوس جمع‌آوري شد. نمونه تيموس گوساله از كشتارگاه تهيه شد و با استفاده از ميكروتوم برش‌هايي به ضخامت 5 ميكرومتري از تيموس تهيه شدند. همچنين لام آماده كبد رت خريداري شد و به موازات آن آزمون استاندارد HEp-2 براي هر نمونه آزمايش گرديدند. جهت تعيين تيتر آنتي‌بادي پنج رقت دو برابر شونده‌ي از سرم (1:40 تا 1:640) با استفاده از بافر فسفات تهيه شده و آزمايش شدند. لام‌هاي رنگ شده با ميكروسكوپ فلورسانس، با بزرگنمايي 200 ميكروسكوپ بازبيني شدند و وجود فلورسانس سبز درخشان در هسته‌ي سلول‌ها به‌عنوان نتيجه مثبت تلقي شد. نتايج: نتايج اين تحقيق نشان داد كه استفاده از سلول‌هاي تيموس گوساله با حساسيت، ويژگي و دقتي برابر با 6/82% ، 100% و 7/91% نسبت‌به آزمون استاندارد در تشخيص آنتي‌بادي‌هاي ضدهسته‌اي (ANA) مفيد بود. ارزش پيشگويي منفي و ارزش پيشگويي مثبت لام‌هاي تيموسي برابر 2/86% و 100 % به‌دست آمد. نتيجه‌گيري: به‌عنوان يك آزمون غربالگرانه‌ي ارزان و در دسترس، مي‌توان از سلول‌هاي تيموس گوساله براي شناسايي ANA در سرم بيماران SLE لوپوس اريتماتو سيستميك استفاده كرد. اگرچه بهينه‌سازي شرايط تهيه و آزمايش و تعيين نقطه Cut off مناسب مي‌تواند كارايي آن را به 100% برساند.

Indirect immunofluorescence test is a most common test for the detection of Systemic Lupus Erythematosis (SLE), however, it is very expensive and is not easily available for all field laboratories. We aimed to evaluate the diagnostic performance of five micrometer thick sections prepared from bovine thymus for the detection of SLE patients. Methods: Totally 48 serum samples (25 negative and 23 positive) were drained from SLE suspected patients. Bovine thymus was purchased from the slaughterhouses. Five micrometer thick sections prepared from bovine thymus. Also rat liver was prepared through the laboratory animal dissection, and assayed in parallel with HEp-2 tests. Two fold serial dilutions (1:40 to 1:640) were prepared for each serum sample using phosphate buffer solution and assayed for ANA. Immunostained cells were observed using a blue filter equiped fluorescent microscope with 200x magnification and any bright green fluorescence accumulation in the cell nucleus was considered as positive for the presence of ANA. Results: Our findings showed sections prepared from thymus cells can be used for the detection of ANA in patient samples and the calculated sensitivity, specificity and accuracy of the test were 82.6%, 100% and 91.7%, respectively. Positive predictive value and negative predictive value of the test were 100% and 86.2%, respectively. Conclusion: We concluded that thymic cells can be easily prepared and used for detection of ANA in SLE patients. However, minor improvements in section preparation and assay conditions as well as determination of a new cut off point is necessary to gain 100% efficiency of the assay