اثر لوپئول و فلوتاميد بر بهبود هايپرفيبروز رحمي ناشي از تجويز دهيدرواپي آندروسترون (DHEA) در موش سفيد كوچك آزمايشگاهي

THE AMELIORATIVE EFFECTS OF LUPEOL an‎d FLUTAMIDE ON DEHYDROEPIANDROSTERONE-INDUCED UTERINE HYPERFIBROSIS IN MICE

پيش زمينه و هدف سندرم تخمدان پلي كيستيك (PCOS) شايع ترين اختلال اندوكرين زنان مي باشد و هايپرپلازي آندومتر و متعاقب آن كاهش باروري و عدم موفقيت بارداري، افزايش موارد ابتلا به فيبروز بافت رحم و سرطان رحم از عوارض رايج آن است. بروز هايپرآندروژنمي داراي نقش محوري در پاتوفيزيولوژي اين سندرم بوده و ايجاد هايپرآندروژنمي تجربي از روش هاي متداول القاي PCOS تجربي مي باشد. داروهاي آنتي آندروژن مانند فلوتاميد در رژيم درماني اين سندرم معمول هستند. با توجه به شواهد موجود در مورد اثرات آنتي آندروژن رسپتوري لوپئول، اثربخشي آن در كاهش عوارض رحمي سندرم PCOS در مقايسه با فلوتاميد موردمطالعه قرار گرفت. مواد و روش كار در اين مطالعه تجربي تعداد 40 سر موش سفيد كوچك آزمايشگاهي ماده نابالغ، به چهار گروه كنترل (C)، گروه PCOS (P)، گروه PCOS +لوپئول (L) و گروه PCOS +فلوتاميد (F) تقسيم شدند. از تزريق روزانه mg/kg 60 DHEA به مدت 20 روز جهت القاي اين سندرم در سه گروه به غيراز گروه كنترل استفاده شد. پس از 20 روز، درمان در سه گروه با حامل دارو يا لوپئول يا فلوتاميد به مدت 15 روز انجام گرفت. در طول دوره تيمار تغييرات وزن حيوانات به دقت اندازه گيري و ثبت گرديد. در پايان تيمار نمونه هاي رحمي جهت بررسي هاي هيستوپاتولوژيك تهيه شده و مقاطع ميكروسكوپي جهت ارزيابي هاي هيستومورفومتريك، كلاژن بافتي و شمارش ماست سل ها با متدهاي H&E، AZAN و تولوئيدن بلو رنگ آميزي و بررسي شدند. يافته ها نتايج اين مطالعه نشان دهنده افزايش معني دار وزن متوسط (گرم) در گروه پي 1/71 ± 28/09 نسبت به گروه C (1/58± 24/17) و كاهش معني دار آن در گروه هاي L (0/86 ± 25/02) و F (1/92 ± 25/82) نسبت به گروه P در پايان دوره تيمار بود (P<0.05). همچنين افزايش معني دار ضخامت متوسط آندومتر (ميكرومتر)، ميانگين درصد كلاژن بافتي (%) و تعداد متوسط ماست سل (n) در واحد سطح مقطع بافت رحم در گروه P (به ترتيب 8/63 ± 6/331، 65/1±60/14، 89/0 ± 02/3) نسبت به گروه C (28/1 ± 235/3، 1/41 ± 8/10، 0/55 ± 1/47) و كاهش معني دار اين شاخص ها در گروه L (51/3 ± 199/8، 0/90 ± 4/07، 0/69 ± 1/02) و F (41/4 ± 194/6، 0/39 ± 5/21، 0/60 ± 1/31) مشاهده گرديد. بحث و نتيجه گيري نتايج اين مطالعه نشان داد كه لوپئول همانند فلوتاميد مي تواند عوارض رحمي ناشي از تجويز DHEA در سندرم تخمدان پلي كيستيك تجربي شامل هايپرپلازي، هايپرفيبروز و افزايش تعداد ماست سل ها را تخفيف دهد. اين يافته مي تواند در تاييد اثرات آنتي آندروژن رسپتوري لوپئول باشد. لوپئول مي تواند به عنوان يك تركيب درماني براي مطالعات تكميلي مدنظر قرار گيرد.

Background & Aims: Polycystic ovary syndrome (PCOS) is the most common endocrine disorder in women of reproductive ages that may contribute to uterine complications such as endometrial hyperplasia and hyperfibrosis. Hyperandrogenemia is the key factor in the pathophysiology of PCOS. Based on recent finding concerning anti-androgen effects of Lupeol, we aimed to study the effects of this triterpenoid on uterine damages of hyperandrogenemia and compare them with Flutamide. Materials & Methods: Forty prepubertal female albino mice aged 25 days were randomly assigned to experimental groups. Control group (n=10) received 0.1 ml/day sesame oil (IP) for 35 consecutive days. The rest of animals received 60 mg/kg B.W./day DHEA dissolved in 0.1 ml sesame oil for twenty days and afterward for fifteen days each group (n=10) was treated either sesame oil[group PCOS(P)], Lupeol 40 mg/kg B.W. (group L) or Flutamide 10 mg/kg B.W. (group F). Weight gains were recorded weekly. At the end of treatment animals were humanly euthanized under deep ether anesthesia and uterine samples were collected. Histological sections were prepared and stained with H&E, AZAN and Toluidine blue methods for histomorphometric, fibrosis and mast cells count analyses. Fibrosis quantification was performed based on image analysis using Matlab software (V. 8.1.0). Results: At the end of treatment period, group P demonstrated remarkable increase of body weight whereas Lupeol and Flutamide treatment decreased weight gain significantly (P<0.05). Endometrium thickness (μm), average percentage of collagen fibers in uterine tissue (%) and average number of mast cells in histological sections (n) in group P (331.6 ± 63.8, 14.6 ± 1.65, 3.02 ± 0.89, respectively) increased significantly compared to group C (235.3 ± 28.1, 8.10 ± 1.41, 1.47 ± 0.55) and decreased in L (199.8 ± 51.3, 4.07 ± 0.90, 1.02 ± 0.69) and F (194.6 ± 41.4, 5.21 ± 0.39, 1.31 ± 0.60) groups significantly compared to group P (P<0.05). Conclusion: We conclude that Lupeol is able to reduce uterine hyperfibrosis and endometrial hyperplasia induced by DHEA in mice and these are similar to effects of Flutamide. These effects of Lupeol could be in part because of its anti- androgen receptor effects