جهش در زيرواحد parC توپوايزومراز IV در جدايه هاي كلبسيلا پنومونيه مقاوم به سيپروفلوكساسين در استان گيلان

MUTATIONS IN PARC SUBUNIT OF TOPOISOMERASE IV IN CIPROFLOXACIN RESISTANT ISOLATES OF KLEBSIELLA PNEUMONIA IN GUILAN PROVINCE

پيش زمينه و هدف كلبسيلا پنومونيه يكي از دلايل شايع عفونت هاي بيمارستاني ازجمله عفونت مجاري ادراري، تنفسي و زخم مي باشد. چندين مكانيسم مقاومت به فلوئوروكوئينولون ها ازجمله جهش در زيرواحدهاي توپوايزومراز IV (parC و parE) پيشنهاد شده است. هدف از اين مطالعه بررسي جهش هاي ژن parC در جدايه هاي كلبسيلا پنومونيه مقاوم به سيپروفلوكساسين در استان گيلان بود. مواد و روش ها در اين مطالعه 40 سويه كلبسيلا پنومونيه از چندين بيمارستان و آزمايشگاه در رشت و لاهيجان جداسازي شد و به كمك روش هاي بيوشيميايي تعيين هويت شدند. حساسيت و مقاومت به آنتي بيوتيك هاي سيپروفلوكساسين، ايمي پنم، آميكاسين، سفكسيم، سفوتاكسيم، سفالكسين، جنتامايسين و ناليديكسيك اسيد تعيين گرديد. به روش كربي بوئر و MIC تعيين گرديد. سپس به روش PCR- سكونسينگ جهش هاي ژن parC در جدايه هاي مقاوم به سيپروفلوكساسين بررسي گرديد. يافته ها 15 درصد جدايه ها به همه هشت آنتي بيوتيك مقاوم بودند. سيزده جدايه مقاوم به سيپروفلوكساسين (32/5 درصد ) بودند. بيشترين درصد مقاومت آنتي بيوتيكي براي سفالكسين (70 درصد) پيدا شد و كم ترين درصد مقاومت آنتي بيوتيكي براي جنتامايسين (17/5 درصد ) تعيين شد. آناليز توالي يابي نشان داد سه جدايه مقاوم به سيپروفلوكساسين داراي جهش هاي بدمعني L38F و يا E84K در ژن parC بودند. نتيجه گيري در استان گيلان به نظر مي رسد جهش هاي parC در ايجاد مقاومت به سيپروفلوكساسين در كلبسيلا پنومونيه از طريق تغيير در تمايل سيپروفلوكساسين به توپوايزومراز IV نقش داشته باشند.

Background & Aims: Klebsiella Pneumonia is a common cause of nosocomial infections including urinary tract, respiratory and wound infections. Several fluoroquinolones resistance mechanisms have been proposed, such as mutations in the topoisomerase IV subunits (ParC and ParE). The aim of this study was to investigate parC mutations in ciprofloxacin resistant isolates of Klebsiella Pneumonia from Guilan province. Materials & Methods: In this study, forty strains of Klebsiella Pneumonia were isolated from several Rasht and Lahijan hospitals and laboratories then were identified by biochemical tests. Antimicrobial susceptibility to ciprofloxacin, imipenem, amikacin, cefixime, cefotaxime, cephalexin, gentamicin, and nalidixic acid was determined by Kirby-Bauer disk diffusion and MIC methods. Then PCR-sequencing was performed to assess parC mutations in ciprofloxacin resistant isolates. Results: 15% of isolates were resistant to all eight antibiotics. Thirteen isolates (32.5%) were ciprofloxacin resistance. The most antibiotic resistance percentage was found for Cephalexin (70%) and the lowest resistance percentage was identified for Gentamicin (17.5%). Sequencing analysis showed that three ciprofloxacin resistant isolates had missense mutations L38F and/or E84K in parC gene. Conclusion: In Guilan province, it seems that parC mutations plays role in developing ciprofloxacin resistance in Klebsiella Pneumonia through change in ciprofloxacin affinity to topoisomerase IV.