شناسايي چندشكلي ژن هاي آلفالاكتالبومين و بتالاكتوگلوبولين در گاوميش بومي استان آذربايجان شرقي

Detection alpha-lactalbumin and β-Lactoglobulin gene Polymorphism in East Azarbaijan province native buffalo using

صفات توليد شير و تركيبات آن جزو صفات كمي و چندژني هست و تحت تاثير تعداد زيادي ژن قرار دارند. اين تحقيق به منظور شناسايي چندشكلي ژن هاي آلفالاكتالبومين و بتالاكتوگلوبولين در گاوميش بومي استان آذربايجان شرقي با استفاده از تكنيك PCR-SSCP صورت گرفت. از تعداد 150 راس گاوميش هاي استان آذربايجان شرقي نمونه شير تهيه و استخراج DNA نمونه ها از شير با روش پروناز صورت گرفت. بعد از انجام مراحل استخراج DNA، واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR) جهت تكثير يك قطعه 392 جفت بازي از اگزون 1 و اينترون 2 ژن آلفالاكتالبومين و قطعه 452 جفت بازي از ناحيه اگزون 2 ژن بتالاكتوگلوبولين انجام شد. براي تعيين چندشكلي نمونه ها، الكتروفورز محصولات PCR پس از تك رشته شدن قطعات (روش SSCP) و الكتروفورز روي ژل آكريلاميد و رنگ آميزي ژل به روش نيترات نقره انجام شد. در نمونه هاي مورد مطالعه سه الگوي باندي مختلف 1 و 2 و 3 براي ژن آلفالاكتالبومين به ترتيب با فراواني 87/5 و 10/71 و 1/78 و پنج الگوي باند مختلف 1 و 2 و 3 و 4 و 5 براي ژن بتالاكتوگلوبولين به ترتيب با فراواني 9/80 و 58/82 و 19/60 و 9/80 و 1/96 مشاهده شد. نتايج بيانگر الگوهاي متفاوت بود كه ميتواند ناشي از وجود چندشكلي در اين جايگاه ها باشد.

Milk production traits and its components are quantitative and polygenic traits affected by many genes. This study was conducted to determine the polymorphism in alpha-lactalbumin and β-lactoglobulin genes using PCR-SSCP method in East Azarbaijan native buffalo. Milk samples were collected from 150 buffaloes of East Azarbaijan native province and then DNA samples were extracted using the pronase method. After DNA extraction specific primers were used for amplification of a 392 bp fragment of exon 1 and intron 2 of the alpha-lactalbumin gene and a 452 bp fragment of exon 2 of the β-lactoglobulin gene. To identify polymorphisms, the PCR products were electrophoresed on polyacrylamide gel (SSCP method) and stained with silver nitrate. Three different banding patterns were observed in samples 1, 2 and 3 for the alpha-lactalbumin gene (with 87.5%, 10.71% and 1.78% frequency) and five different band patterns were observed for the for the β-lactoglobulin gene, with 9.80%, 58.82%, 19.60, 9.80% and 1.96% frequency. The results indicate that the different patterns may be due to polymorphism in these fragments.