معرفي سيستم كشت پلت سلول هاي بنيادي مزانشيمي مشتق از بافت چربي انسان به عنوان يك مدل كشت آزمايشگاهي به منظور اهداف مهندسي بافت غضروف

Introduction of Pellet Culture System of Human Adipose- Derived Mesenchymal Stem Cells as an In Vitro Model for Cartilage Engineering Approaches

بيماري ها و آسيب هاي مختلف مي توانند منجر به از بين رفتن بافت غضروفي شوند. ايجاد روش مهندسي بافت غضروف بر پايه سلول هاي بنيادي، فرصت اميدواركننده اي را به منظور ترميم سلول هاي آسيب ديده فراهم ساخته است. به تازگي، سلول هاي بنيادي مزانشيمي مشتق از چربي به دليل خصوصيات منحصر به فردي همچون تمايز به رده هاي مختلف سلولي توجه زيادي را به خود معطوف ساخته است. هدف از انجام اين مطالعه، معرفي سيستم كشت پلت سلول هاي بنيادي مزانشيمي مشتق از چربي انسان به عنوان يك مدل كشت آزمايشگاهي به منظور اهداف مهندسي بافت غضروف مي باشد. مواد و روش ها اين مطالعه به صورت آزمايشگاهي در سال 1391 در آزمايشگاه سلول هاي بنيادي جهاد دانشگاهي قم انجام شد. در اين مطالعه، ابتدا سلول هاي بنيادي مزانشيمي از بافت چربي انسان جداسازي شده و پس از تكثير در محيط آزمايشگاهي توسط انجام سانتريفوژ به شكل سيستم پلت در محيط تمايزي كندروژنيك حاوي محيط DMEM كشت گرديده و توانايي بقاي سلولي و بيان ژن هاي ويژه غضروف به ترتيب به وسيله روش هاي يل-2و5-دي متيل تترازوليوم MTT و Real-time PCR مورد ارزيابي قرار گرفت. در اين مطالعه، تجزيه و تحليل داده ها توسط آزمون t مستقل صورت پذيرفت. يافته ها نتايج حاصل از اين مطالعه با استفاده از ارزيابي MTT و Real-time PCR به ترتيب توانايي بقا و تكثير سلولي و بيان ژن هاي مخصوص غضروف را در سلول هاي تمايز يافته به بافت چربي با استفاده از سيستم كشت پلت مشخص نمود. نتيجه گيري طبق نتايج حاصل از اين مطالعه، روش كشت پلت مي تواند به عنوان يك راهكار مناسب جهت تمايز سلول هاي بنيادي مزانشيمي مشتق از چربي به رده غضروفي مورد استفاده قرار گيرد.

Various diseases and injuries can lead to loss cartilage tissue. Cartilage tissue engineering based on the use of stem cells which has provided a promising opportunity to repair damaged tissue. Recently، adipose-derived mesenchymal stem cells (ADSCs) have captured considerable scientific and clinic interest because of their easy access، rapid expansion in vitro and ability to differentiate into diverse cell lines. The aim of this study was to introduce the pellet culture system as an in vitro model for cartilage engineering approaches. Materials an‎d Methods This experimental study was performed in Stem Cell laboratory، The Academic Center for Education، Culture and Research، Qom in 2013. In this study، ADSCs were isolated and expanded from human adipose tissue. The cells were centrifuged and the chondrogenic differentiation was performed in pellet culture system. Viability potential and chondrogenic genes expression were evaluated by MTT assay and Real-time PCR analysis، respectively. In this study، data statistical analysis was carried out by independent T-test. Results In this study، our obtained results using MTT assay and Real-time PCR analysis demonstrated cell survival ability and proliferation and also the expression of chondrogenic-specific genes at pellet in comparison with control group. Conclusion It is suggested that this method can be used for induction of chondrogenic