جداسازي و شناسايي مولكولي اكتينوميست‌هاي دريازي خليج فارس و ارزيابي آن‌ها جهت توليد متابوليت‌هاي سيتوتوكسيك ضد ‌‌سرطان سينه در شرايط آزمايشگاهي

Isolation and Molecular Identification of Marine Actinomycetes spp. Isolated from Persian Gulf and their Evaluation for Production of Cytotoxic Anti Breast Cancer Metabolites in in vitro condition

اكتينوميست­هاي دريايي ظرفيت زيادي براي توليد تركيبات فعال زيستي منحصر به فرد با توجه به سازگاري خاص خود در محيط­ هاي دريا دارند. هدف از اين تحقيق جداسازي اكتينوميست­ هاي توليدكننده تركيبات ضد سرطاني از رسوبات بستر جنگل حراي خليج‌فارس و بررسي پتانسيل توليد متابوليت­هاي ضد­سرطان سينه از اين ارگانيسم ­ها است. در اين مطالعه، 40 نمونه از رسوبات بستر جنگل حرا در سال 1394جمع­آوري شد. نمونه ­ها رقيق شدند و براي جداسازي اكتينوميست­ ها روي محيط كشت انتخابي استارچ كازيين آگار كشت داده شدند. جدايه­ها بر اساس ويژگي­ هاي ريخت‌شناسي و ميكروسكوپي كلني­ها شناسايي و جداسازي شدند. جداسازي متابوليت­ها با استفاده از اتيل استات از اكتينوميست هاي جداسازي شده انجام شد و اثر كشندگي سلولي آن‌ها بر رده­ي سلولي سرطان سينه انساني در شرايط آزمايشگاهي ارزيابي گرديد. در انتها باكتري­هاي توليد كننده متابوليت مؤثر بر رده سلولي سرطان سينه، با روش مولكولي شناسايي شدند. از رسوبات، تعداد 186 ايزوله اكتينوميست جداسازي و شناسايي شد. نتايج نشان داد كه متابوليت ايزوله­هاي اكتينوميست داراي فعاليت سميت سلولي متغيري بر ضد رده سلولي سرطان سينه مي­باشند و ايزوله‌هاي HP 2 و HP 4 داراي بيشترين فعاليت كشندگي سلول نسبت به بقيه ايزوله ­ها بودند. نتايج اين تحقيق نشان داد رسوبات جنگل حراي خليج‌فارس غني از اكتينوميست­ هاي فعال توليدكننده تركيبات ضد­سرطاني جديد است، كه نيازمند شناسايي و خالص‌سازي اين دسته از باكتري‌ها مي‌باشد. اين نتايج شواهدي را مبني بر ضرورت بررسي بر روي ميكروب­ هاي دريايي كشف شده به‌عنوان يك پتانسيل جديد دارويي در زمينه داروسازي نشان مي­دهد.

Marine Actinomycetes have great potential as producers of unique bioactive compounds due to its special adaptation in the harsh environment in the ocean. This study aimed to isolate anti-tumor producing Actinomycetes from sediments of the Harra island of Persian Gulf and investigate their potential as anti-breast cancer metabolites production in Actinomycetes bacteria. In this study, 40 Sediments of the Harra island of Persian Gulf were collected in 2015. Samples were diluted and cultured in Starch Casein Agar (SCA) selective media. The Actinomycetes were isolated and purified using morphological and microscopy methods. 40 strains were cultured in Starch Casein Broth (SCB) and the metabolites were extracted using ethyl acetate. The produced metabolites were extracted from active strains and cytocidal activities were evaluated against breast cancer cell line. Finally, effective metabolites producing bacteria were identified using molecular method. Of the sediments, 186 strains were isolated and identified. Results showed that the isolates had cytocidal activities against breast cancer cell line. The results revealed that the strains 2HP and 4HP were shown more anti-cancer activities than the others. Results of this study declared that sediments of the Harra island of Persian Gulf are rich in active Actinomycetes, in producing of new anti-cancer compounds, that need to be identified and purified. These results give evidence that it is essential to scrutinize these under explored marine microbes in search of new drugs which have great potential to be used in the pharmaceutical fields.