شناسايي جهش‌هاي اگزون‌ 6، 13 و 20 ژن BRCA1 در بيماران مبتلا به سرطان پستان در استان خراسان جنوبي

Identification of the BRCA1 Gene Mutations in Exons 6, 13, and 20 in Patients with Breast Cancer, South Khorasan Province, Iran

مقدمه:سرطان پستان، شايع‌ترين بدخيمي در زنان و به‌‌عنوان اولين علت مرگ‌و‌مير ناشي از سرطان در زنان شناخته مي‌شود.اين بيماري به شدت ناهمگن بوده و تحت تأثير عوامل ژنتيكي و محيطي به‌وجود مي‌آيد. جهش در دو ژن بسيار پرنفوذ BRCA1 و BRCA2 كه نقش مهمي در ترميم DNA دارند، علت اصلي 30-20% سرطان‌هاي پستان ارثي شناخته شده است. مطالعه حاضر با هدف بررسي فراواني جهش‌هاي ژن BRCA1 در افراد مبتلا به سرطان پستان در جمعيت خراسان جنوبي انجام شد. روش‌كار:اين مطالعه توصيفي بين سال‌هاي 96-1394 بر روي 88 بيمار مبتلا به سرطان پستان شهر بيرجند انجام شد. از افراد نمونه خون جمع‌آوري شد. قطعات مورد نظر ژن BRCA1 با استفاده از DNA استخراج شده از بيماران و تكنيك PCR تكثير گرديد. براي مشخص كردن جهش‌هاي اگزون‌ 6، 13 و 20 از تكنيك PCR-SSCP، رنگ‌آميزي نيترات نقره و توالي‌يابي مستقيم DNA استفاده شد. تجزيه و تحليل داده‌ها با استفاده از نرم‌افزار آماري SPSS (نسخه 22) انجام گرفت. يافته‌ها: بررسي اگزون 6 و 20 در بيماران هيچ جهشي را نشان نداد. در بررسي اگزون 13 يك پلي‌مورفيسم مشاهده شد. اين واريانت c.4308T>C در 28 نمونه تشخيص داده شد كه 4 نفر (2/14%) آنها مبتلا به سرطان پستان ارثي بودند. فراواني جهش در افراد مبتلا به سرطان پستان وراثتي 3/36% و در افراد مبتلا به سرطان پستان غير وراثتي 1/31% در جمعيت مورد مطالعه بود. نتيجه‌گيري: در اين مطالعه ميزان بروز جهش در دو اگزون 6 و 20 از ژن BRCA1 صفر و يك جهش از نوع پلي‌مورفيسم rs1060915در اگزون 13 از ژن BRCA1 با فراواني 8/31%مشاهده شد.

Introduction: Breast cancer is the most prevalent malignancy among females and the first leading cause of death from cancer in women. This highly heterogeneous disease is multifactorial. Mutations in BRCA1 and BRCA2 genes, which contribute to DNA repair, are the causes of 20-30% of hereditary breast cancers. Therefore, this study was conducted to determine the BRCA1 mutations in patient with breast cancer in South Khorasan Province, Iran, during 2015 to 2017. Methods: In this descriptive study, we collected 88 peripheral blood samples from patients with breast cancer, 11 of which had a positive family history of the disease. The BRCA1 gene was amplified in the DNA isolated from female patients using polymerase chain reaction (PCR) technique. Then, the BRCA1 mutations in exons 6, 13, and 20 were analyzed by PCR-single-strand conformation polymorphism (SSCP), silver nitrate staining, and DNA sequencing. Data analysis was performed using SPSS software, version 22. Results: In this study, no mutation was observed in the exons 6 and 20. In addition, a polymorphism was found in the exon 13. This variant (c.4308T>C) was detected in 28 patients, four of them (14.2%) had hereditary breast cancer. The frequency of the mutation was 36.3% and 31.1% in patients with hereditary and non-hereditary, respectively. Conclusion: In this study, BRCA1 gene mutations did not occur in exons 6 and 20. Additionally, a polymorphism rs1060915 in exon 13 of the BRCA1 gene was observed with the frequency of 31.8%