بررسي فنوتيپي وژنوتيپي ژن هاي تشكيل دهنده بيوفيلم استافيلوكوكوس اورئوس جدا شده از موارد باليني و غذايي با روش ‌ميكروتيترپليت و Multiplex PCR

The phenotypic and genotypic study of Staphylococcus aureus biofilm genes isolated from clinical and food cases by microtiterpolytte and Multiplex PCR

زمينه و هدف: مهمترين فاكتورحدت استافيلوكوكوس اورئوس توانايي تشكيل بيوفيلم مي­باشد. اين باكتري توانايي اتصال و نفوذ به داخل سلولهاي بافت را دارد. عفونت هاي بيوفيلمي معمولاً مزمن و برگشت پذير بوده و به درمان دشوار پاسخ مي دهند. هدف از تحقيق حاضر شناسايي ژنهاي بيوفيلم در استافيلوكوكوس اورئوس هاي جدا شده از نمونه­هاي باليني و مواد غذايي با استفاده از روش PCR چندگانه است. روش بررسي: در اين مطالعه با استفاده از تكنيك PCR چندگانه، 60 جدايه استافيلوكوكوس اورئوس كشت شده از انسان و مواد غذايي پس از استخراج ژنوم، جهت بررسي حضور ژنهاي ادهزين مورد بررسي قرار گرفت. بررسي فنوتيپي تشكيل بيوفيلم با استفاده از روش ميكرو پليت تيتراسيون Microtiter plates assay انجام گرديد. يافته‌ها: در مجموع، تعداد 60 نمونه مواد غذايي و انساني مورد مطالعه تعداد 6 نمونه ماده غذايي 20% و از بين نمونه­هاي انساني 2 ايزوله 67/6% توان تشكيل بيوفيلم را به طور متوسط داشته­اند. همچنين در 30 ايزوله جداسازي شده از مواد غذايي، فراواني ژنهاي fnbB, clfB, clfA به ترتيب 80%، 66/76%، 20% شناسايي شد. در حااليكه در بين 30 نمونه باليني فراواني ژنهاي fnbB, clfB, clfA به ترتيب33/93%، 70%، 66/6% گزارش گرديد. ژنfnbA در هيچ يك از نمونه­ها شناسايي نشد. نتيجه‌گيري: نتايج مطالعه نشان از فراواني شيوع ژن­هاي ايجادكننده بيوفيلم وهمچنين بيان فنوتيپي نسبتاً بالايي را در بين نمونه­هاي مورد بررسي نشان داد كه مي­تواند با بروز مقاومت در بين ايزوله­هاي استاف اورئوس مرتبط باشد.

Background and Aim: The most important factor in the formation of Staphylococcus aureus is the ability to form biofilms. This bacterium has the ability to bind and penetrate into tissue cells. Biofilmic infections are usually chronic and reversible and respond to difficult treatment. The purpose of this study was to identify biofilm genes in Staphylococcus aureus isolated from clinical and food samples using multiple PCR methods. Materials and Methods: In this study, 60 isolates of Staphylococcus aureus cultured from human and food after extraction of genome were used to study the presence of adherent genes using multiple PCR techniques. The phenotypic study of biofilm formation was performed using Microtiter plates assay microplate technique. Results: In total, 60 samples of food and humans studied included 6 samples of foodstuff, 20% of samples and of 2 samples clinical 6.67% isolated from biofilms. In 30 isolates isolated from food, the frequency of fnbB, clfB, clfA genes was identified as 20%, 76.66%, 80%, respectively. However, among the 30 clinical samples, fnbB, clfB, clfA genes were 6.66%, 70%, 93.33%, respectively. The fnbA gene was not detected in any of the samples. Conclusion: The results of the study showed that the high prevalence of biofilm-inducing genes and also a relatively high phenotypic expression among the samples showed that it could be related to the resistance of the isolates of Staphylococcus aureus.