بررسي آنتي بيوگرام و رديابي ژن‌هاي مرتبط بيماري‌زا در سويه‌هاي انتروكوكوس فكاليس

Antibiogram analysis and tracking of the virulence-related genes in Enterococcus faecalis isolates

زمينه و هدف: انتروكوكوس‌ها، پاتوژن­هاي فرصت‌طلبي هستند كه بيماري‌زايي آن‌ها ناشي از حضور چند ژن عامل بيماري‌زايي است. شير الاغ منبع تغذيه‌ا­ي جديد غير آلرژيك براي انسان است؛ لذا بررسي الگوي مقاومت آنتي‌بيوتيكي و تشخيص حضور برخي ژن‌هاي مهم و مؤثر در بيماري‌زايي انتروكوكوس فكاليس‌هاي جداسازي شده از آن ضرورت دارد. روش بررسي: در اين مطالعه تجربي، تعدادي سويه‌ انتروكوكوس فكاليس از شير الاغ جمع ­آوري شد. الگوي مقاومت اين سويه‌ها نسبت به ده آنتي‌بيوتيك از جمله ونكومايسين بر اساس پروتكل CLSI و با استفاده از آزمون فيشر مورد بررسي و مقايسه قرار گرفت. آزمون تكثير ژن‌هاي بيماري‌زايي gelE، esp، ace، as و efaA به كمك PCR صورت گرفت. يافته ­ها: سويه‌هاي انتروكوكوس فكاليس نسبت به آنتي‌بيوتيك‌هاي اريترومايسين و آزيترومايسين مقاوم و نسبت به آمپي‌سيلين و پني‌سيلين حساس بودند. سويه­ هاي LUB93929 و LUB93101 جداسازي شده در مطالعه قبلي، به ترتيب نسبت به ونكومايسين حساس و مقاوم بودند. آزمون PCR نشان داد كه هر دوسويه‌ي انتروكوكوس فكاليس به همراه سويه شاهد، داراي ژن‌هاي gelE، efaA و ace بودند. ژن as تنها در يك سويه­ حضور داشت. در نهايت در هيچ‌كدام از سويه­ ها ژن esp مشاهده نشد. نتيجه‌گيري: عليرغم وجود برخي ژن­هاي بيماري‌زا و مقاومت به ونكومايسين در برخي از سويه‌ها، به دليل عدم وجود مجموع فاكتورهاي بيماري‌زايي، سويه ­هاي انتروكوكوس فكاليس شير الاغ احتمالاً بيماري‌زا نباشند. ژن eps در تشكيل بيو فيلم و اجتماع عفونت­هاي بيمارستاني دخالت دارد، سويه­ هاي انتروكوكوس فكاليس شير الاغ بيو فيلم تشكيل نمي دهند و از اين­رو به نظر مي‌رسد كه مشكل­ساز نباشند.

Background and Aim: Enterococcus species are opportunistic pathogens and their pathogenicity seems to be related to the presence of a number of pathogenicity genes. Since donkey’s milk is a new non-allergenic source of nutrition, this study was performed to assess the antibiogram and detection of pathogenicity genes in some Enterococcus faecalis isolates from donkey’s milk. Materials and Method: In this experimental study, several Enterococcus faecalis isolates were isolated from donkey’s milk. Resistance patterns of the isolates to 10 antibiotics including vancomycin were investigated based on CLSI protocol. Statistical comparison was made by Fisher's exact test. Polymerase chain reaction (PCR) amplification was used to study gel E, esp, ace, as and efaA pathogenicity related genes. Results: Enterococcus faecalis isolates showed a different antibiogram pattern. Isolates were resistant to azithromycin, and erythromycin, but were susceptible to ampicillin and penicillin. Previously isolated LUB93929 and LUB93101 isolates were found to be susceptible and resistance to vancomycin, respectively. GelE, ace and efaA genes were detected in both Enterococcus faecalis isolates and also in Enterococcus faecalis in the control strains. The aggregation substance gene (as) was only amplified in LUB93101 isolate. Interestingly, esp gene was not detected in any of the isolates. Conclusion: Despite resistance to vancomycin and presence of some pathogenicity related genes in this study, Enterococcus faecalis isolates may not be human pathogens due to lack of pathogenic factors. The esp gene is crucial for biofilm formation and rise of nosocomial infections. Donkey’s milk Enterococcus faecalis isolates are not able to form biofilm and seem not to bring any problem.