بررسي تغييرات الگوي بيان ژن VEGF و القاء آپوپتوز در رده سلولي سرطان پستان 7-MCF تيمار شده با كروسين

Evaluation of VEGF gene expression levels and induction of apoptosis in crocin-treated MCF-7 breast cancer cells

مقدمه: هدف گيري فاكتور رشد اندوتليالي عروقي (VEGF) به عنوان يك هدف درماني در تومور هاي جامد و به خصوص سرطان پستان مي باشد. به دليل عدم ايجاد عوارض جانبي در سلول هاي سالم، استفاده از داروهاي حاوي تركيبات طبيعي در درمان سرطان در حال افزايش مي باشد. كروسين به عنوان ماده موثر زعفران نشان داده كه اثرات بيولوژيكي مختلفي در انواع بدخيمي ها دارد. هدف از اين مطالعه بررسي اثر كروسين بر مهار رشد، القاء آپوپتوز و الگوي بيان ژن VEGF در رده سلول سرطان پستان 7-MCF مي باشد . روش بررسي: در اين مطالعه مداخله اي، اثر كروسين در القاء مرگ سلولي در غلظت هاي مختلف از 0 تا 8 ميلي گرم بر ميلي ليتر در زمان هاي 24 تا 48 ساعت به كمك تست رنگ سنجي MTT انجام شد. رنگ آميزي Annexin V/ PI و متود realtime - PCR به ترتيب براي بررسي نوع مرگ سلولي و ارزيابي الگوي بيان ژن VEGF به كار گرفته شد. به منظور تجزيه و تحليل داده ها از نرم افزار 16.SPSS v و آزمون غير پارامتريك ANOVA استفاده شد و مقادير 0/05>p معني دار در نظر گرفته شد. نتايج: سلول هاي 7-MCF تيمار شده با كروسين در مقايسه با گروه كنترل كاهش معني داري در رشد و تكثير در زمان 24 و 48 ساعت در يك روند وابسته به دور و زمان نشان دادند. خروجي دستگاه فلوسايتومتري نشان از افزايش درصد سلول هاي آپوپتوتيك مطابق با افزايش غلظت كروسين داشت. هم چنين كاهش بيان ژن VEGF در يك الگوي وابسته به زمان در سلول هاي تيمار شده مشاهده شد ( 0/05 >p). نتيجه گيري: نتايج نشان مي دهد كه كروسين باعث القاء آپوپتوز وابسته به زمان و در عين حال كاهش بيان ژن VEGF در سلول هاي 7-MCF مي شود. مطالعات بيشتري براي پي بردن به كارايي قطعي كروسين به عنوان يك داروي ضد سرطان در درمان سرطان پستان ضروري مي باشد.

Introdution: Targeting vascular endothelial growth factor (VEGF) is considered as a therapeutic goal in solid tumors; especially breast cancer. The use of drugs with natural compounds in the treatment of cancer is increasing because of exerting no adverse effects in normal cells. Crocin, as the main component of saffron, has been proved to have different biological activities on various types of malignancies. The aim of this study was to evaluate the effect of crocin on growth inhibition, induction of apoptosis and expression of VEGF in MCF-7 breast cancer cell line. Methods: In this interventional study, MTT cytotoxic assay was performed to evaluate the cell deathinducing effects of crocin on MCF-7 cells growth at different concentrations ranging from 0 to 8 mg/mL for 24 to 48 hours. Annexin V/PI staining and realtime-PCR assay were used in order to determine the type of cell death and assess the changes in the expression pattern of VEGF gene, respectively. The nonparametric ANOVA test was applied for data analysis via SPSS software version 16 where p-value less than 0.05 were regarded statistically significant. Results: Compared to untreated cells, crocin-treated MCF-7 cells demonstrated a significant decrease in growth at 24 and 48 hours in a dose- and time-dependent manner. Results of Flow-cytometry showed an increase in the percentage of apoptotic cells coincident with increased crocin concentration. Also, decreased expression of the VEGF in a time-dependent manner was observed p<0.05). Conclusion: The results indicated that crocin induces marked apoptosis in a time-dependent manner while reducing the expression of VEGF in MCF-7 cells. More studies are required to confirm the efficacy of crocin as an anti-tumor agent for cancer therapies.