شناسايي تركيبات شيميايي عصاره هاي آبي و الكلي ريشه گياه شيرين بيان و مقايسه تاثير آپوپتوزي آنها بر روي رده سلولي سرطان كبد

Identification of the chemical constituents of aqueous and alcoholic Glycyrrhiza glabra root extracts and its comparative apoptotic study against human hepatocarcinoma cell line

مقدمه: كارسينوماي هپاتوسلولار HCC Hepatocellular carcinoma به عنوان يكي از شايع ترين بدخيمي اوليه كبد و سومين علت شايع مرگ در اثر سرطان به شمار مي رود. اين مطالعه با هدف بررسي مقايسه اي تركيبات شيميايي و آپوپتوز سلولي دو نوع عصاره الكلي و آبي ريشه گياه شيرين بيان بر روي رده سلولي سرطاني كبد HepG2 انجام گرفت. روش بررسي: در اين مطالعه تجربي، تركيبات شيميايي عصاره هاي آبي و الكلي گياه شيرين بيان با استفاده از روش GC/ MS مورد ارزيابي قرار گرفته شد. رده سلولي سرطان كبد HepG2 در محيط كشت RPMI1640 حاوي 10 ٪ سرم جنين گاوي تحت شرايط دماي 37 درجه سانتي گراد و دي اكسيد كربن 5 درصد رشد داده شدند. فعاليت سمي عصاره هاي آبي و الكلي با كمك آزمون رنگ آميزي MTT طي زمان 24 ساعت محاسبه شد. به منظور ارزيابي القاي آپوپتوز در سلول هاي HepG2 از رنگ آميزي هوخسمت 33258 استفاده شد. نتايج: آناليز داده هاي فيتوشيميايي عصاره آبي، تعداد 18 تركيب را نشان داد كه عمده ترين ميزان آن مربوط به Dodecane (13/34%) و Dihydroxyacetophenone bistrimethylsilyl ) others-6,'2 ( ٪12/48 ) بود. آناليز داده هاي فيتوشيميايي عصارة الكلى، 17 تركيب شيميايي شناسايي شد كه بيشترين درصد مواد تشكيل دهنده آن (7Pentadecane ( ٪7/78 و Tetramethylhexadecane- 2, 6 , 11 , 15 (٪4/67) بود. نتايج تست MTT نشان داد كه سلول هاي تيمار شده با عصاره ها سميت سلولي وابسته به دوز دارند. نتايج رنگ آميزي هوخست 33258 نشان داد عصاره الكلي نسبت به آبي مي تواند باعث قطعه قطعه شدن بيشتر DNA هسته اي رده سلولي سرطاني HepG2 شود. نتيجه گيري: با توجه به نتايج اين پژوهش مي توان گفت كه عصاره الكلي ريشه گياه شيرين بيان نسبت به عصاره آبي اثر القاي آپوپتوز بيشتري بر روي سلول هاي سرطاني HepG2 دارد و با تحقيقات بيشتري مي توان از آن در درمان سرطان كولون بهره برد.

Introdution: Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most common cancers. It is the third leading cause of cancer related death. This study aimed to evaluate the phytochemical composition of ethanolic and aqueous Glycyrrhiza glabra root extracts its apoptotic effects against human hepatocarcinoma HepG2 cell line. Methods: In the current experimental study, the phyochemical composition of aqueous and ethanolic Glycyrrhiza glabra extract was evaluated by GC/MS method. The HepG2 cells were grown in RPMI1640 supplemented with 10 % (v/v) FBS at 37°C with 5 %carbon dioxide (CO2) atmosphere. The cytotoxicity activities of extracts were measured using MTT after 24 hours. To evaluate the ability of extracts to trigger apoptosis in HepG2 cells, the Hosest8778 staining method was carried out. Results: The phytochemical data of aqueous extract revealed 18 compounds, including Dodecane (13.34%) and 2',6'-Dihydroxyacetophenone bis (trimethylsilyl) ether (12.48%) as the major constitutes. The chemical composition of ethanolic extract showed 17 compounds, including Pentadecane (7.78%), 2,6,11,15- Tetramethylhexadecane (4.67%) as the prominent compounds. The MTT results revealed that the extracttreated cells had a dose-related toxicity effects. The results of Hoechst 33258 staining showed that the nuclear DNA fragmentation was increased in the ethanolic extract treatment compared to aqueous extract. Conclusion: The ethanolic extract of Glycyrrhiza glabra possesses more apoptotic effect on cancer cells and further researches are needed for investigating its potential mechanism.