فرمولاسيون كمپلكس كاتيوني ليپوزوم- siRNA درمانگر جهت توسعه براي مقابله با استئوساركوما

Formulation of a therapeutic cationic liposome-siRNA complex for development to fight osteosarcoma

ليپوزوم‌هاي كاتيوني به‌عنوان جايگزيني براي حامل‌هاي ويروسي براي رسانش ژن مطرح شده اند. چالش عمده در رسانش siRNA، ناپايداري ليپوزوم است كه هم چنان به عنوان يك مساله جدي است. هدف از اين مطالعه ارائه فرمولاسيون ليپوزومي مناسب به‌منظور غلبه بر اين ناپايداري است. روش بررسي: در پژوهش حاضر (علمي-بنيادي به روش تجربي-‌‌‌آزمايشگاهي)؛ فرمولاسيون ليپوزومي حاوي فسفاتيديل كولين سويا، فسفوليپيد كاتيوني DOTAP، كلسترول و پلي اتيلن گليكول را از طريق روش آب‌پوشاني لايه نازك سنتز شده و siRNA را از طريق انكوباسيون بر روي ليپوزوم‌ها بارگذاري گرديد. در ادامه؛ بهينه‌سازي بارگذاري siRNA در دستور كار قرار گرفت. سپس پارامتر‌هايي مربوط به سايز، پتانسيل زتا، شاخص پراكندگي، پايداري طولاني مدت كمپلكس ليپوزوم- siRNA گزارش شد. داده‌ها به وسيله نرم‌افزار GraphPad Prism ورژن 7 آناليز شدند. تمامي داده‌ها با سه مرتبه تكرار همراه بوده و به صورت ميانگين±انحراف معيار گزارش شدند. نتايج: در اين مطالعه موفق به توليد ليپوپلكس siRNA با راندمان بالاي بارگذاري siRNA گرديده‌ايم. نانوذرات توليد شده كلوخه‌اي نبوده و به مدت 3 ماه در دماي˚C 4 پايدار بوده است. اين نانوسامانه توانسته است با موفقيت siRNA را به سلول‌هاي سالم استخواني برساند. بررسي‌ها نشان از عدم سميت سامانه خالي (بدون ژن) داشته است. نتيجه‌گيري: ليپوزوم پگيله تهيه شده پتانسيل بالايي براي رسانش siRNA به سلول‌هاي استخوان دارد.

Introdution: Cationic liposomes have been presented for gene delivery as an alternative vector instead of viral vectors. A major challenge associated with siRNA delivery is the instability of liposomes, which is still a serious problem. The aim of this study was to provide an appropriate formulation to overcome this instability. Methods: In the present study (Scientific-Fundamental, Experimental-Laboratory Study), liposomal formulation containing soy phosphatidylcholine, cationic DOTAP, cholesterol and polyethylene glycole was synthesized by thin-film hydration method and the siRNA were loaded on liposomes through incubation. In the following; the optimization of siRNA loading was on the agenda. Then the parameters related to size, zeta potential, polydispersity index and lon-term stability of siRNA-liposomes complex were reported. The Data were analyzed by GraphPad Prism version 7 Software. All data were repeated three times and reported as mean±standard deviation. Results: In this study we were able to produce siRNA lipoplex with high loading efficiency of siRNA. The produced nanoparticles did not agglomerate and were stable at 4 oC for 3 months. This nanosystem could successfully deliver siRNA to normal bone cells. Studies have shown that the blank system (no gene) had no toxicity. Conclusion: The prepared PEGylated liposomes have a great potential for delivery of siRNA to bone cells.