اثر مهاري الكتروپوريشن و نانوذرات نقره بر رشد پروماستيگوتهاي ليشمانياماژور: تاثير پهناي زماني پالس

Inhibitory effect of electroporation and silver nanoprticles on the growth of leishmania major promastigotes: Influence of pulse duration

مقدمه ليشمانيوز جلدي (CL ) يك بيماري انگلي است كه توسط گونه هاي مختلف از يك تك ياخته اي تاژكدار ليشمانيا از طريق پشه خاكي ماده از گونه فلبوتوموس به انسان انتقال مي يابد. در اين مطالعه اثر پالس هاي الكتريكي بر پروماستيگوتهاي ليشمانيا ماژور در پهناي زماني مختلف در حضور نانوذرات نقره مورد بررسي واقع شده است. روش كار نوع اين مطالعه علوم پايه بوده كه در پاييز سال 1390در مركز تحقيقات فيزيك پزشكي دانشگاه علوم پزشكي مشهد واقع در پژوهشكده بوعلي انجام گرفت. ابتدا انگل ليشمانيا ماژور با سويه MRHO/IR/75/ER در محيط كشت RPMI 1640 ، در شرايط استاندارد كشت و سوسپانسيون پروماستيگوتها با غلظت parasites/ 10ml 6×40 تهيه و با نانوذرات نقره اي كه بيشينه توزيع سايز آنها در 6 نانومتر بود، در غلظت هاي 24 و 12 ميكرو مولار به مدت 1ساعت انكوبه شد. سپس 8 پالس الكتريكي توسط يك دستگاه الكتروپوريتورECM 830 در چهار پهناي زماني 50، 100، 150 و 200 ميكروثانيه با قدرت 2500 V/cm و فركانس يك هرتز به نمونه ها اعمال شد. 24 ساعت بعد درصد بقاي پروماستيگوتها در هر نمونه به روش MTS تعيين گرديد. نتايج نتايج نشان داد افزايش پهناي زماني پالس به تنهايي موجب نوساناتي در بقاي پروماستيگوتها شده كه نسبت به يكديگر معني دار نبوده است. اما حضور نانوذرات نقره و اعمال همزمان پالس هاي الكتريكي افت معني داري در بقاي پروماستيگوتها فراهم مي نمايد. به نظر مي رسد كه همياري پالس هاي الكتريكي با نانوذرات نقره در غلظت 24 ميكرومولار با اعمال پالسهاي با ديوريشن 150 ميكروثانيه و قدرت 2500 ولت برسانتي متر، براي كاهش ميزان تكثير و بقاي پروماستيگوتها موفقيت آميز بوده است ( p<0.004 ). نتيجه گيري حضور نانوذرات نقره و اعمال همزمان پالس هاي الكتريكي افت معني داري در كاهش بقاي انگل فراهم مي نمايد.

Introduction :Cutaneous Leshmaniasis (CL) is a parasitic disease which is caused by different flagellated protozoan species of leishmania. The objective of this study was to evaluate the effect of electroporation on leishmania major promastigotes using different pulse durations in the presence of silver nanoparticles (SNP). Materials and Methods : Promastigotes of L. major were cultured in RPMI-1640 medium supplemented with 10% FCS at 27°C. The promastigote suspension with a concentration of 40´106 parasite/ml was prepared. It was incubated in the presence of SNP of 6 nm in two various concentrations. By an ECM 830 electroporator device 8 electrical pulses were applied in four duration widths of 50، 100، 150 and 200 microseconds with an electrical field magnitude of 2500 V/cm and a frequency of 1 Hz. Then 24 hrs later the percentage of promatigote survival was measured in each sample by the MTS method in order to determine the IC50 of SNPs and also the effect of certain electrical pulses in the presence and absence of SNPs. Results : It seems that in the presence of SNPs at 24 micromolar concentration، the contribution of electrical pulses with a duration of 150 microseconds and an electrical field magnitude of 2500 V/cm was successful in reducing the proliferation rate of promastigotes (p<0.004). Conclusion : Electrical pulses in the presence of SNPs can lead to a significant decrease in parasite survival rate.