بررسي اثرات آگونيست GnRH بر روي ميزان آپوپتوز سلولهاي گرانولوزاي فوليكولهاي موش هاي صحرايي

Effects of GnRH agonist on follicular granulosa cell apoptosis of rats

زمينه و هدف: هورمون آزادكننده گنادوتروپين (GnRH) علاوه بر هيپوتالاموس، در تخمدان هم توليد مي شود و روي تمايز سلولي و ايجاد فوليكول هاي آترتيك تاثير مي گذارد. با توجه به اين كه مرگ سلول هاي گرانولوزا طي روند آترزي فوليكولي به واسطه پديده آپوپتوز صورت مي گيرد. ما در اين مطالعه وقوع آپوپتوز در سلول هاي گرانولوزاي فوليكول هاي تخمدان موش صحرايي را تحت تاثير يكي از آگونيست هاي GnRH يعني بوسرلين استات مورد بررسي قرار مي دهيم. مواد و روش ها: در اين مطالعه تجربي موردي شاهدي دوازده سر موش صحرايي نژاد ويستار ماده 25 روزه از خانه حيوانات به صورت غير تصادفي و در دسترس تهيه و به دو گروه آزمايش و كنترل (n=6) تقسيم شدند. موش هاي صحرايي گروه آزمايش و كنترل به ترتيب روزانه به مقدار 0.2 mg/kg بوسرلين و سرم فيزيولوژيك به مدت چهار روز دريافت كردند. 24 ساعت بعد از آخرين تزريق، موش ها با دوز كشنده كلروفرم بيهوش، سپس تخمدان ها خارج شدند.نمونه ها ابتدا در فرمالين 10% فيكس و پس از پاساژ با استفاده از ميكروتوم دوار از آنها مقاطع پنج ميكروني تهيه شد. براي بررسي آپوپتوز در برش هاي بافتي از روش تانل پي او دي استفاده شد. سپس داده ها با استفاده از نرم افزار Graphpad instant و آزمون independent t-test آناليز شدند و سطح معني داري p£0.05 در نظر گرفته شد. نتايج: نتايج به دست آمده نشان داد ميانگين درصد سلول هاي آپوپتوتيك در گروه كنترل (0.52±2.14) و در گروه آزمايش (1.71±3.75) و (P£0.0001) بود. از نظر آماري اين اختلاف افزايش معني دار بود. نتيجه گيري: اين يافته ها بيانگر اين مطلبند كه بوسرلين، آپوپتوز را در سلول هاي گرانولوزاي فوليكول هاي تخمدان افزايش مي دهد.

Background: Gonadotropin-releasing hormone (GnRH) has been found to be expressed in ovaries in addition to hypothalamus to modulate cell differentiation and induces atretic follicles. Since the death of granulosa cells during the process of follicular atresia occurs by apoptosis phenomenon, in this study, we investigated the occurrence of apoptosis of granulosa cells of rat ovarian follicles under the influence of Buserelin acetate, a GnRH agonist. Materials and Methods: In this experimental case-control study, twelve 25-day-old female Wistar rats were randomly divided into 2 groups. The study and control groups received 0.2 mg/kg/d Buserelin acetate and normal saline, respectively, for 4 days. 24 hours after the last injection, the rats were anesthetized with a lethal dose of chloroform and ovaries were removed. Specimens were fixed in 10% formalin. After the passage, five-micron sections were prepared using a rotary microtome. Measurement of apoptosis was performed using a calibrated light microscope after TUNEL POD staining. Data were analyzed in GraphPad InStat software using independent t-test. P ≤ 0/05 was statistically considered significant. Results: These data showed the average percentage of apoptotic cells in the control group 2/14 ± 0/52, and in the experimental group 3/75 ± 1/71. This difference was statistically significant (p≤0.0001). Conclusion: These findings suggest that Buserelin acetate increases apoptosis in the granulosa cells of ovarian follicles.