تغيير فاكتورهاي آپوپتوزي PARP, Caspase-3 و نسبت Bax/Bcl-2 در ناحيه تگمنتوم شكمي پس از اكتساب ترجيح مكان شرطي و دوره ترك مصرف مورفين در موش بزرگ آزمايشگاهي

Changes in apoptotic factors caspase-3, PARP and Bax/Bcl-2 ratio in the ventral tegmental area after the acquisition and extinction of morphine-induced conditioned place preference in the rat

سابقه و هدف: تحقيقات پيشين نشان داده‌اند كه مورفين مزمن القا‌كننده آپوپتوز مي‌باشد. از جمله مراكز اصلي در مدار پاداش ناحيه تگمنتوم شكمي (Ventral tegmental area, VTA) مي‌باشد. تحريك مسير پاداش در مغز توسط مورفين مي‌تواند از طريق فعال كردن رسپتورهاي اپيوئيدي سبب القاء فاكتورهاي آپوپتوزي در برخي از مناطق مغزي شود و بيان رسپتورهاي مرگ را در سطح سلول افزايش دهد. در اين مطالعه تغيير فاكتورهاي پروتئيني Bax/Bcl-2 ، PARP، caspase-3 دخيل در آپوپتوز، در پاسخ به دوزهاي مختلف مورفين در دوره اكتساب و ترك به مصرف مورفين در حيوان بررسي گرديد. مواد و روش‌ها: آزمايشات رفتاري و مولكولي بر روي شصت و چهار موش صحرايي نر بالغ Wistar انجام گرديد. در بخش رفتاري از مدل ترجيح مكان شرطي (Conditioned place preference, CPP) شد. در اين مدل، به حيوانات در طول دوره شرطي‌سازي در گروه‌هاي مختلف، سالين و دوزهاي mg/kg 0/5 ،5 و 10 مورفين تزريق گرديد. هم‌چنين اثر مورفين (mg/kg 5) در ناحيه VTA در روزهاي چهارم و هشتم ترك مصرف مورفين، نيز بررسي گرديد. در بخش مولكولي، ميزان فاكتورهاي آپوپتوزي, با روش وسترن بلاتينگ در هر گروه بررسي شد. يافته‌ها: داده‌هاي به‌دست آمده در بخش رفتاري نشان داد كه مورفين با دوزهاي mg/kg 5 و 10 به‌طور معني‌داري سبب ترجيح مكان شرطي مي‌شوند. اين در حالي است كه در دوره ترك، اثر مورفين موثر (mg/kg 5) در روز چهارم هم‌چنان معني‌دار و در روز هشتم ترجيح مكان شرطي ديده نشد. در بخش مولكولي، فاكتورهاي آپوپتوزي در سه گروه تيمار شده به مورفين به طور معني‌داري در VTA در دوز mg/kg 5 بيش‌ترين افزايش را نشان مي‌دهند. در حالي كه در دوره ترك هيچ تغييري در روند آپوپتوز ديده نشد. نتيجه‌گيري: به نظر مي‌رسد كه مورفين در تمامي دوزها سبب آپوپتوز مي‌گردد وليكن با افزايش دوز درگيري گيرنده‌هاي اوپيوئيدي متفاوتي ديده و اثرات نوروپروكتيو مورفين نيز ظاهر مي‌شود

Introduction: Chronic high doses of morphine inhibit cell proliferation and induce cell death. One of the centers in reward pathway is the ventral tegmental area (VTA). Stimulation of opioid receptors in the reward circuit in the brain by morphine could be enabling a factor induce apoptosis in some brain regions, and expression of death receptors increases on the cell surface. This study was designed to evaluate the effect of morphine on changes in apoptotic factors (Bax/Bcl-2, PARP and caspase-3) in the VTA during the acquisition of morphine-induced conditioned place preference (CPP) and extinction period. Materials and Methods: In this study, in behavioral experiments, the CPP paradigm was done on 64 adult male albino Wistar rats. In saline-control and three doses of morphine (0.5, 5, 10 mg/kg) experimental groups in acquisition, in addition with effective dose of morphine (5 mg/kg) evaluate extinction period (8 days). Then, in the molecular section the changes in apoptotic proteins assess with western blot technique. Results: We found that apoptotic factors increase in all three experimental groups in response to morphine. However, the most response was significantly occurred at the dose of 5 mg/kg morphine. Additionally, there is no change has been seen in the apoptotic factors during the extinction period. Conclusion: It seems that morphine in all doses cause apoptosis, but quite contrary, by increasing the dose of morphine, the number of receptors involved in apoptosis increases and morphine’s neuroprotective effects are appeared.