اثر لاكتوفرين شير شتر ريزپوشاني‌شده با كمپلكس‌هاي ايزولۀ پروتئين آب‌‌‌پنير-پكتين بر رشد و زنده‌ماني ردۀ سلولي استئوبلاست MG63

The Effect of Encapsulated Camel milk’s Lactoferrin with Whey Protein Isolate-pectin Complexes on the Growth and Viability of MG63 Osteoblast Cell

لاكتوفرين يكي از مهم‌ترين تركيبات زيست‌فعال بشمار مي‌رود كه قادر به افزايش فعاليت سيستم ايمني و استخوان‌سازي مي‌باشد. اما اين تركيب نسبت به استرس‌هاي محيطي حساس است. ازاين‌رو، توليد نوشيدني فراسودمند از لاكتوفرين ريزپوشاني‌شده توسط نانوكمپلكس‌هاي حاوي پكتين/ايزولۀ پروتئين آب‌پنير (WPI/HMP) در پژوهش حاضر موردبررسي قرار گرفت. تشكيل نانوكمپلكس در غلظت كلي بيوپليمر (w/w) 0/4 درصد در pHهاي اسيدي (3، 5/3 و 4) با دو روش اسيدي‌سازي قبل از اختلاط (Pr-A) و اسيدي‌سازي بعد از اختلاط (Po-A) انجام گرفت. به‌‌منظور ريزپوشاني لاكتوفرين اين تركيب به كمپلكس WPI/HMP كه در روش (Pr-A) با نسبت 2:1 تشكيل‌شده بود، افزوده شد. نتايج ارزيابي پتانسيل زتا و بررسي قطر ذرات نشان داد كه با افزايش نسبت پكتين ميزان بار منفي بيشتر شده و اندازۀ نانوذرات افزايش يافت. بررسي اثر لاكتوفرين ريزپوشاني‌شده توسط نانوكمپلكس بر ازدياد سلول استئوبلاست MG63 با استفاده از آزمايش MTT نشان داد كه لاكتوفرين ريزپوشاني‌شده با غلظت 50 ميكروگرم در ميلي‌ليتر رشدي معادل كنترل مثبت داشته و به‌دليل اينكه نمونۀ لاكتوفرين خالص با غلظت 50 ميكروگرم در ميلي‌ليتر داراي 16 درصد افزايش رشد نسبت به كنترل مثبت بوده است مي‌توان نتيجه گرفت كه تقريباً تمامي لاكتوفرين در تركيب يادشده ريزپوشاني‌شده و يا با اتصال به كمپلكس از دسترس سلول دور مانده است. لاكتوفرين ريزپوشاني‌شده با غلظت 100 ميكروگرم در ميلي‌ليتر توسط نانوكمپلكس، رشدي معادل 113 درصد دارد و ازنظر آماري در سطح لاكتوفرين خالص با غلظت 50 ميكروگرم در ميلي‌ليتر قرار مي‌‌گيرد

Lactoferrin is one of the most important bioactive compounds that can increase the activity of the immune system and osteogenicity. However, it is sensitive to environmental stresses. Hence, the production of functional beverage including encapsulated lactoferrin by noncomplex of WPI/HMP was investigated in the current work. Nanocomplex was prepared by a complexation of whey protein isolate (WPI)-high methoxyl pectin (HMP) at total biopolymer concentration of 0.4% (w/w) at pH values of 3, 3.5 and 4 through post and pre-blending acidification procedures. In order to encapsulate lactoferrin, it was inserted to the WPI/HMP complex in which formed by the ratio 2:1 and pre-acidification (Pr-A).The results of Zeta-potential and particle sizes showed that by increasing HMP, the negative sites of the complex increased as well as the size of nano-particles. The effect of entrapped lactoferrin in WPI/HMP nano-particles on osteoblastic proliferation by MTT assay showed WPI/HMP+LF50 μg/mL a growth equal to the rate of positive control. For example the pure lactoferrin concentration of 50 μg/mL progressed 16% growth compared to the positive control. Therefore, it can be concluded that almost all lactoferrin in WPI/HMP+LF50 μg/mL combined or complexed and the cell access failed. The lactoferrin entrapped by WPI/HMP+LF100 μg/mL had a 113% growth and statistically occured at level of pure lactoferrin 50 μg/mL.