بررسي فراواني و پراكنش ماكروفاژهاي رحمي در روزهاي چهارونيم و هفتم بارداري موش NMRI

Frequency and distribution of uterine macrophages on days 4.5 and 7 of pregnancy in NMRI mice

سابقه و هدف: ماكروفاژها نقش مهمي در لانه‌گزيني مناسب رويان و حفظ بارداري ايفا مي‌كنند. اين مطالعه به منظور بررسي فراواني و پراكنش ماكروفاژهاي رحمي (تغييرات موضعي) و ماكروفاژهاي طحالي (تغييرات سيستميك) در روزهاي چهار و نيم و هفت بارداري موش كه متقارن با شروع لانه‌گزيني جنين و استقرار كامل جنين در رحم موش مي‌باشد، انجام شد. مواد و روش‌ها: تعيين روز بارداري از طريق تشخيص پلاك واژينال صورت گرفت. از موش‌هاي باردار در روزهاي چهارونيم و هفتم بارداري خون‌گيري شد و غلظت هورمون‌هاي 17-بتا-استراديول و پروژسترون سرم با الايزا سنجش شد. هم‌چنين با استفاده از روش ايمونوهيستوشيمي و آنتي‌بادي ضد شاخص F4/80، فراواني و چگونگي پراكنش ماكروفاژهاي رحم و طحال در روزهاي مذكور بررسي شد. يافته‌ها: اين مطالعه نشان داد كه فراواني ماكروفاژها در روز هفتم بارداري در مقايسه با روز چهارونيم كاهش معناداري يافته است. در روز چهارونيم بارداري ماكروفاژها در تمامي نواحي بافت رحم از جمله ميومتر، اطراف غدد رحمي و اطراف لومن گسترش داشتند در حالي كه در روز هفتم پراكنش آن‌ها به ميومتر و استروماي زير عضلات حلقوي محدود بود. فراواني ماكروفاژهاي طحالي به‌عنوان نماينده‌اي از تغييرات سيستميك اين سلول‌ها در روزهاي مورد بررسي تغيير معناداري نداشت. غلظت سرمي 17-بتا-استراديول و پروژسترون در روز هفتم بارداري نسبت به روز چهارونيم افزايش معناداري داشت. نتيجه‌گيري: با توجه به تغييرات غلظت هورمون‌هاي 17-بتا-استراديول و پروژسترون در طول بارداري و تاثيرات غير مستقيم آن‌ها بر فراخواني و پراكنش ماكروفاژها از طريق تنظيم سنتز M-CSF و GM-CSF توسط سلول‌هاي استرومائي رحم، تغييرات فراواني و جايگيري اين سلول‌ها در رحم طي مراحل مختلف بارداري قابل توجيه است. در حالي‌كه عوامل جذب و لانه‌گزيني و منابع توليدي جاذب‌هاي شيميايي ماكروفاژها در طحال با رحم متفاوت است و تحت تاثير تغييرات غلظت هورمون‌هاي تخمداني قرار نمي‌گيرد. با توجه به نقش اساسي ماكروفاژها در لانه‌گزيني رويان و كنترل پاسخ‌هاي ايمني مادر، تغييرات اين سلول‌ها در موضع بارداري مي‌تواند براي پيشبرد بارداري موفق تاثيرگذار باشد

Introduction: Macrophages play a crucial role in appropriate embryo implantation and maintenance of pregnancy. This study was done to evaluate the frequency and distribution of uterine (local changes) and spleen (systemic changes) macrophages on days 4.5 and 7 of NMRI mouse pregnancy which are simultaneous with beginning of implantation and complete establishment of embryo in the uterus. Materials and methods: The precise day of pregnancy was determined through vaginal plug detection. Blood was collected from pregnant mice on days 4.5 and 7 of gestation and serum 17- β estradiol and progesterone concentrations were measured using the ELISA method. The frequency and localization of macrophages in different regions of uterus and spleen were also investigated by immunohistochemistry staining using anti F4/80 antibody. Results: The results of this study showed that frequency of uterine macrophages has decreased on day 7 in comparison to day 4.5 of gestation. Macrophages are distributed throughout the whole uterus on day 4.5 while their distribution was restricted to myometrium and stroma beneath the circular muscles on day 7 of pregnancy. The frequency of spleen macrophages as a representative of their systemic changes was not different in studied groups. Serum 17-β estradiol and progesterone concentrations increased significantly on day 7 compared to day 4.5 of pregnancy. Conclusion: Considering the changes in 17-β estradiol and progesterone concentrations and their indirect effects on macrophages recruitment through regulation of M-CSF and GM-CSF secretion by uterine stromal cells, the differences in frequency and distribution of macrophages in different stages of pregnancy could be explained. While the macrophages chemotactic factors and homing receptors and their sources in spleen are different from uterus and don’t response to ovarian hormones variations. Regarding the role of macrophages in embryo implantation and regulation of feto-maternal immune responses, it seems that the changes in their frequency and localization can be helpful for a successful pregnancy.