بررسي فراواني نسبي جهش در ژن فريدوكسين در ايزوله‌هاي تريكوموناس واژيناليس جدا شده از زنان مبتلا به واژينيت در زنان مراجعه كننده به كلينيك زنان ياسوج در سال 1396

Frequency of Mutations in Friedoxin Gene in Trichomonas Vaginalis Isolated From Women With Vaginitis Referred to Yasuj Gynecologic Clinic in 2017

زمينه و هدف: تريكومونيازيس شايع‌ترين عفونت غير ويروسي منتقله از راه جنسي در سراسر جهان مي‌باشد. در مطالعه‌هاي قبلي در زنان مراجعه كننده به كلينيك زنان شهر ياسوج، آلودگي به انگل تريكوموناس واژيناليس، با روش‌هاي مختلف تشخيص باليني 04/19 درصد و 28 درصد، با روش ميكروسكوپي 9/42 درصد و 41 درصد و با روش ملكولي 11 درصد گزارش شده است. مقاومت انگل به مترونيدازول مشكل درماني موجود مي‌باشد كه در اين مقاومت، جهش در ژن فريدوكسين انگل نقش مهمي ‌دارد. هدف از اين مطالعه فراواني جهش و تعيين نقطه جهش در اين ژن در انگل‌هاي جدا شده از بيماران مراجعه كننده به كلينيك زنان ياسوج در سال 1396بود. روش بررسي: در اين مطالعه توصيفي كه در سال 1396 انجام شد، تعداد 46 نفر بيمار داراي علايم باليني واژينيت انتخاب و پس از ثبت اطلاعات فردي به همراه علايم باليني در پرسشنامه، از هر بيمار دو نمونه سواب واژينال تهيه شد. يك نمونه در لوله آزمايش حاوي سرم فيزيولوژي براي بررسي ميكروسكوپي و نمونه ديگر در محيط كشت دورسه براي رشد انگل قرار داده شد. در نهايت دي ان آي تروفوزوئيت‌هاي به دست آمده با استفاده از كيت استخراج و با دو بار انجام آزمايش PCR مختلف وجود تريكوموناس واژيناليس و ژن فريدوكسين تأييد گرديد. باندهاي حاصل از پي‌سي‌آر ژن فريدوكسين به وسيله كمپاني بيونر كره جنوبي تعيين توالي گرديد و در پايگاه NCBI به منظور يافتن محل جهش، بلاست شدند. نتايج با استفاده از تعيين درصد و روش‌هاي آماري توصيفي تحليل گرديد. يافته‌ها: بر اساس يافته‌هاي اين پژوهش، 20 نمونه(47/43 درصد) در مطالعه‌هاي ميكروسكوپي و محيط كشت از نظر تريكوموناس واژيناليس مثبت بودند و 12 نمونه(08/20 درصد) در PCR، مثبت شدند. ژن فريدوكسين در اين 12 نمونه، تكثير و توالي يابي شد. در هيچ‌كدام از نمونه‌هاي بررسي شده جهش در ژن فريدوكسين ديده نشد. نتيجه‌گيري: تغييرات در ژن فريدوكسين باعث مقاوت به مترونيدازول در درمان تريكومونيازيس مي‌گردد، كه در اين مطالعه از نمونه‌هاي مورد بررسي چنين تغييري ديده نشد و اين بدان معنا مي‌باشد كه در اين نمونه‌ها هيچ مقاومت درماني مرتبط با ژن فريدوكسين وجود نداشته است.

Background & aim: Trichomoniasis is the most common non-viral sexually transmitted disease worldwide. In previous studies in women referred to the Yasuj gynecologic clinic, Trichomonas vaginalis infection was reported by three methods: clinical diagnosis (19/04% - 28%), microscopic (42/9% - 41%) and polymerase chain reaction (11%). Parasite resistance to metronidazole is a therapeutic problem. In this resistance, mutation in the parasite ferredoxin gene plays an important role. In the present study, frequency of mutation and determination point of the mutation in this gene, in isolated parasites from patients referring to Yasuj women's clinic in 2017 were investigated. Methods: In the present descriptive study, forty-six patients with clinical signs of vaginitis were selected. Then, they were asked to fill out a questionnaire. Two swabs of each vaginal sample were taken from each patient. One specimen in a test tube containing physiological serum for microscopic examination and another sample was placed in Dorset medium for growth of the parasite. DNA extraction were extracted using a kit and PCR experiments were performed to confirm the presence of trichomonas vaginalis and fiducoxin genes two times. The sequences of fibridoxin gene pseudo-bands were sequenced by South Korean bioresorpants and blast in the NCBI database to find the location of the mutation. The results were analyzed using descriptive statistics and statistical methods. Results: Out of forty-six samples, twenty samples (43.44%) were positive for Trichomonas vaginalis in microscopic and culture media and twelve samples (20.08%) were positive in PCR. The ferredoxin gene was reproduced and sequenced in these 12 samples. No mutation in ferredoxin gene was detected in any of the studied samples. Conclusion: Changes in the ferredoxin gene resulted in metronidazole discontinuation in the treatment of trichomoniasis, which was not seen in the present study samples. It meant that there was no therapeutic resistance associated with ferredoxin gene in these specimens.