اثر دو فاكتور Nurr1 و GDNF بر حفاظت نورونهاي دوپامين ساز SHSY5Y در مقابل التهاب عصبي و مسموميت ناشي از 6OHDA

هدف: در اين تحقيق از بيش بيان فاكتورهايNurr1 و GDNF، به‏دليل پتانسيل ضدالتهابي و ترميمي آن‏ها و نيز نقش  Nurr1در تنظيم بيان ژن گيرنده GDNF(Ret)، با هدف حفاظت سلول‏هاي دوپامين سازSHSY5Y در مقابل التهاب عصبي و نيز مسموميت 6OHDA  استفاده شد.مواد و روش ها: ابتدا لنتي ويروس‏هاي نوتركيب حامل ژن‏هايNurr1 وGDNF تهيه و به‏ترتيب به سلول‏هاي SHSY5Y و آستروسيتوما ترانسداكت شدند. همچنين براي توليد بهينه فاكتور GDNF، سلول‏هاي HEK293T با ناقل پلاسميدي مربوطه ترانسفكت و محيط مشروط آن‏ها و نيزسلول‏هاي آستروسيتوما، حاوي فاكتور GDNF، جمع آوري شد. بيش بيان ژن‏هاي مزبور با RTPCR به اثبات رسيد. از سوي ديگرسلول‏هاي ميكروگليا از مغز نوزاد رت جداسازي و متعاقبا با ليپوپلي ساكاريد (LPS) فعال و نهايتا بيان فاكتورهايTNFα و iNOS در آن‏ها با تستگريسوRTPCR اثبات شد؛ محيط مشروط ميكروگليا جمع آوري و به‏همراه محيط مشروط سلول‏هاي آستروسيتوما/HEK293T  به سلول‏هاي  SHSY5Yافزوده شد. رده يSHSY5Y به‏صورت جداگانه نيز با محيط مشروط آستروسيتوما / HEK 293T و توكسين 6OHDA تيمار شد.نتايج: آناليز MTT نشان داد سلول‏هاي SHSY5Y با بيان فزاينده Nurr1  و يا در حضور GDNF، مقاومت بيشتري در برابر التهاب عصبي و توكسين6OHDA نشان مي‏دهند. همچنين GDNF و Nurr1 با هم اثر سينرژيك داشته و مقاومت بيشتري را به سلول‏هاي دوپامين ساز عطا مي‏كنند.نتيجه گيري: فاكتورهايNurr1  و GDNF به تنهايي و نيز به‏صورت توام و سينرژيك، اثر حفاظتي بر نورون‏هاي دوپامين ساز در مقابل عوامل التهابي و توكسين 6OHDA دارند.