هدفمند سازي بيان آنتي ژن سطحي هپاتيت ب (HBsAg) در غده هاي سيب زميني با استفاده از روش بيان موقت

هدف: به‫منظور بررسي كارايي پيش‫بر اختصاصي غده (Patatin1)، بيان آنتي ژن HBsAg واكسن هپاتيت ب در گياه سيب زميني با استفاده از روش بيان موقت (اگرواينفيلتريشن) مورد ارزيابي قرار گرفت. مواد و روش ها: پيش‫بر اختصاصي غده (Pat1) با استفاده از آغازگرهاي اختصاصي با روش واكنش زنجيري پليمراز (PCR) از گياه سيب زميني جدا شد. اين پيش‫بر در بالادست ژن بهينه سازي شده سنتزي HBsAg در ناقل دوگانه pBI121 همسانه سازي شد. به‫منظور مقايسه كارايي پيش‫بر اختصاصي Pat1، ژن HBsAg تحت كنترل پيش‫بر دايمي CaMV35S هم قرار داده شد. سازه هاي تهيه شده پس از انتقال به اگروباكتريوم با استفاده از روش اگرواينفيلتريشن به غده ها و برگ هاي گياه سيب زميني انتقال يافتند. بيان موقت آنتي ژن HBsAg با استفاده از روش الايزا اندازه گيري شد.   نتايج: بررسي بيان آنتي ژن HBsAg در برگ ها و غده هاي گياه سيب زميني نشان داد كه پيش‫بر Pat1 به‫طور اختصاصي باعث بيان بالاي آن در بافت هاي غده اي مي شود. بيان اندك اين آنتي ژن تحت كنترل پيش‫بر Pat1 در بافت هاي برگي هم گزارش شده و مي تواند تاحدي به عوامل القا كننده در محيط تلقيح بستگي داشته باشند. در حالي‫كه بيان آنتي ژن تحت پيش‫بر دايمي CaMV35S در تمامي بافت هاي برگي و غده اي اتفاق مي افتد. همچنين نتايج حاصل نشان داد كه ژن HBsAg بهينه شده كدني براي گياه سيب زميني به‫خوبي عمل كرده و آنتي ژن مربوط را بيان مي كند. نتيجه گيري: نتايج اين پژوهش نشان مي دهد كه از پيشبر اختصاصي غده سيب زميني Pat1 همسانه سازي شده مي توان به‫طور موثري براي بيان دايمي آنتي ژن سنتزي بهينه سازي شده كدني HBsAg در گياهان تراريخت سيب زميني استفاده كرد.