بررسي نقش چپروني پروتئين Hsp70 از ماهي Rutilus frisii kutum در غيرفعال سازي حرارتي لوسيفراز در شرايط in vivo

هدف: نقش چپروني پروتئين Hsp70 از ماهي Rutilus frisii kutum در غيرفعال سازي حرارتي لوسيفراز در سلول باكتري E. coli كوترنسفرم شده حامل ژن‌هاي لوسيفراز و چپرون مورد بررسي قرار گرفت. مواد و روش‫ها: انتقال هم‫زمان دو وكتور بياني حاوي ژن‌هاي Hsp70 و لوسيفراز به سلول‌هاي باكتري E. coli انجام شد. سپس بيان سلول‌هاي كوترنسفرم شده تحت شرايط بهينه انجام پذيرفت. بعد از افزودن تتراسايكلين، نمونه‌هاي باكتري در دماهاي 40، 42، 44، 46، 48 و 50 درجه سانتي‫گراد در طي زمان 60 دقيقه انكوبه شدند و در نهايت فعاليت لوسيفراز نمونه‫ها اندازه‫ گيري شد. نتايج: در دماهاي 40 و 42 درجه سانتي‫گراد  با گذشت زمان 30 دقيقه، فعاليت لوسيفرازي در نمونه‌هاي كنترل تقريبا به صفر مي‌رسد، در صورتي‌كه در نمونه‌هاي كوترنسفرم به‫ترتيب حدود 72 درصد و 60  درصد فعاليت لوسيفرازي نسبت به نمونه‌هاي كنترل (‫قبل از تيمار حرارتي) حفظ شد و حتي پس از60 دقيقه نيز تا 36  درصد و 22 درصد فعاليت همچنان باقي ماند. همچنين در استرس دماهاي 44 و46 درجه  سانتي‫گراد، اختلاف قابل ملاحظه‌اي بين فعاليت لوسيفرازي نمونه كوترنسفرم و كنترل در زمان‌هاي اوليه پس از اعمال استرس مشاهده شد. در صورتي‌كه در دماهاي 48 و 50 درجه  سانتي‫گراد فعاليت لوسيفرازي نمونه كوترنسفرم نسبت به نمونه كنترل حتي در زمان‌هاي اوليه استرس اندك بود. نتيجه گيري: تجمع حرارتي لوسيفراز به عنوان يك پروتئين گزارش‫گر مهم، در دماهاي بالا با توجه به فعاليت چپرون  Hsp70 در سلول باكتري مهار شود كه اين امر مي‌تواند در صنايع غذايي، داروسازي و تهيه‌ي كيت‌هاي تشخيص سرطان كاربردهاي فراواني داشته باشد.