كلون و بيان ژن نوتركيب هومون رشد با استفاده از برچسب تيوردوكسين

هدف: در قرن حاضر، توليد داروهاي نوتركيب افزايش يافته است. از جمله اين داروها، هورمون رشد مي‏باشد كه به‏علت مشكلاتي كه در پروسه­ي بيان نوع سيتوپلاسمي و پري پلاسمي اين پروتئين وجود دارد، يافتن راه حلي كه بتواند بيان را بهينه نمايد ضروري به‏نظر مي‏رسد. لذا در اين تحقيق با استفاده نمودن از trxtag بيان هورمون رشد را به‏صورت محلول بهينه شد كه علاوه بر افزايش بيان پرتئين (حل مشكل پري پلاسمي) از تشكيل انكلوزيون بادي (مشكل سيتوپلاسمي) جلوگيري مي‏نمايد.مواد و روش­ها: سنتز ژن و كاست ژني به‏منظور بيان هورمون رشد در سيستم بياني pET 32a صورت گرفت. كاست ژني شاملtrxtag  براي محلول سازي پروتئين،His tag  به‏منظور خالص سازي و انتروكيناز در ابتداي ژن rHgh به‏منظور جداسازي برچسب هاي قبلي از اين پروتئين مي‏باشد.نتايج: بعد از كلون سازي اين ژن در وكتور و بيان آن، تاييد آن توسط وسترن بلات صورت گرفت. نتايج به‏دست آمده با استفاده از نرم افزارهاي آناليز ژل درصد بياني حدود  از كل بيان را در سويه نوتركيب نشان مي­دهد.نتيجه گيري: در اين تحقيق، نشان داده شد كه با استفاده از Trxtag مي‏توان پروتئين را به‏حالت محلول در آورد و ميزان بيان را بالا برد در ادامه با انجام مراحل  تخمير و پايين دستي مي‏توان به نتايج بهتري دست يافت.