عنوان مقاله :
بهبود توليد رده‌هاي سلولي پرتوان هاپلوئيد از جنين‌هاي پارتنوژنتيك موش به واسطه مهار همزمان مسيرهاي پيام‌رساني MEK و TGFβ
پديد آورندگان :
ملامحمدي ، سپيده - گروه زيست‌شناسي تكويني , شيروي ، عبدالحسين - گروه زيست‌شناسي تكويني , حسني ، نفيسه - گروه سلولهاي بنيادي و زيست‌شناسي تكويني تهران , بهاروند ، حسين - گروه سلولهاي بنيادي و زيست‌شناسي تكويني تهران
كليدواژه :
جنين پارتنوژنتيك موش , سلولهاي بنيادي جنيني هاپلوئيد , مسير پيام‌رساني ERK و TGF-β
چكيده فارسي :
هدف: در اين طرح توليد سلولهاي بنيادي جنيني هاپلوئيد پارتنوژنتيك در حضور مهاركننده‌هاي مسيرهاي پيام‌رساني ERK و TGFβ بررسي شده است. مواد و روش‌ها: ابتدا بلاستوسيست‌هاي پارتنوژنتيك حاصل از فعال‌سازي شيميايي اووسيت‌ها، در محيط R2i (حاوي PD0325901 و SB431542 كه بهترتيب مسيرهاي پيام‌رساني ERK و TGFβ را مهار مي‌كنند) كشت شدند. سپس رده‌هاي سلولهاي بنيادي جنيني پارتنوژنتيك در اين محيط تكثير و نگهداري شدند. با استفاده از رنگ‌آميزي ايمونوفلورسانس و qRTPCR، بيان ماركرهاي پرتواني و با روش تمايز خودبهخودي و ايجاد تراتوما پتانسيل تمايزي اين سلول‌ها ارزيابي شدند. ميزان هاپلوئيدي نيز با استفاده از روش فلوسايتومتري تعيين گرديد. نتايج: در شرايط R2i، حدود 50 درصد از جنين‌هاي پارتنوژنتيك، رده سلولي توليد كردند و 10 تا 13 درصد سلولهاي هر رده به‌صورت هاپلوئيدي بودند. سلولهاي بنيادي پارتنوژنتيك توليد شده در محيط R2i ويژگي‌هاي سلولهاي بنيادي پرتوان مانند مورفولوژي، پاساژپذيري، بيان ژن‌هاي ويژه پرتواني در سطح mRNA و پروتئين را نشان دادند. همچنين اين سلول‌ها قادر به تمايز خودبهخودي به مشتقات سه لايه زاينده جنيني و ايجاد تراتوما بودند. نتيجه‌گيري: مهار مسيرهاي پيام‌رساني ERK و TGFβ مي‌تواند شرايط مناسبي را براي توليد سلولهاي بنيادي هاپلوئيد از جنين‌هاي پارتنوژنتيك فراهم كند.
عنوان نشريه :
سلول و بافت
عنوان نشريه :
سلول و بافت
