جداسازي و تعيين توالي ژن چالكون سنتاز از گياه استبرق (Calotropis procera)

هدف: چالكون سنتاز (CHS) آنزيم كليدي در مسير بيوسنتزي فلاونوئيد مي‌باشد و نخستين مرحله بيوسنتز فلاونوئيدها را كاتاليز مي‌كند. هدف اين تحقيق شناسايي ژن چالكون سنتاز در گياه استبرق بود. مواد و روش‏ها: DNA ژنومي از برگ‏هاي تازه استخراج و به‏عنوان الگو جهت PCR استفاده شد. آغازگرها بر اساس نواحي حفاظت شده اين ژن از ساير گياهان طراحي شدند. فراورده حاصل از PCR تخليص و توالي‌يابي شد. نتايج تعيين توالي ابتدا هم‌رديف و سپس با توالي‌هاي برخي ژن‌هاي CHS موجود در بانك ژن و با نرم‌افزار DNAMAN مقايسه شد. درخت فيلوژنتيكي مربوط به توالي CHS در استبرق و گونه‌هاي گياهي ديگر با نرم افزار MEGA 6 و به‏روش Neighbor-joining رسم شد. نتايج: نتايج PCR بيانگر وجود ژن چالكون سنتاز و تكثير قطعه 572 نوكلئوتيدي متعلق به اگزون شماره2 اين ژن بود. اين  با نام CpCHS و شماره بازيابي (KM878672) در بانك ژن ثبت شد. مقايسه توالي CpCHS با ساير توالي‌هاي ژن CHS نشان داد اين ژن با توالي CHS درArabidopsis thaliana59 درصد، Nicotiana tabacum 63 درصد، Olea europaea 63 درصد و Petunia x hybrida 64 درصد يكساني دارد. بيشترين يكساني با توالي ژن CHS در Catharanthus roseus و برابر با 68 درصد بود. رسم درخت فيلوژني نشان داد كه CpCHS با ژن CHS گياه Catharanthus roseus در يك شاخه قرار دارد. نتيجه گيري: اين نتايج نشان مي‌دهد كه به احتمال CpCHS نيز همانند ساير ‍‍‍‍ژن‌‌هاي CHS در تنظيم مسير بيوسنتزي فلاونوئيدها نقش دارد و شناسايي اين ژن در گياه استبرق منجر به يافتن راه‏كاري كارآمد جهت افزايش توليد مواد مؤثره دارويي و ارزشمند اين گياه باشد.