عنوان مقاله :
بررسي اثر بهينه‌سازي كدوني بر ميزان بيان نانوبادي Anti-VEGF
پديد آورندگان :
سليماني زاده ، مژگان - دانشكده كشاورزي , باقري ، عبدالرضا - گروه بيوتكنولوژي و به نژادي گياهي , جلالي جواران ، مختار - گروه بيوتكنولوژي كشاورزي , سيفي ، عليرضا - گروه بيوتكنولوژي و به نژادي گياهي , بهداني ، مهدي - بخش بيوتكنولوژي , كاظمي لمعه دشت ، فاطمه - بخش بيوتكنولوژي
كليدواژه :
بيان موقت , بهينه‌سازي كدوني , زراعت مولكولي , ناقل ويروسي , نانوبادي
چكيده فارسي :
گياهان به‌دلايل متعددي به‌عنوان بيوراكتورهاي ارزشمند براي توليد انواع پروتئين‌هاي نوتركيب (به‌ويژه آنتي‌بادي‌هاي مونوكلونال و...) مي‌توانند مورد بهره‌برداري قرار گيرند. استفاده از ناقل‌هاي ويروسي گياهي براي بيان موقت، يك استراتژي مفيد براي توليد پروتئين‌هاي مهم دارويي از قبيل آنتيباديها در مقياس بالا و در يك دوره زماني خيلي كوتاه پيشنهاد ميشود. امروزه، سرطان دومين عامل مرگ و مير در جامعه بشري است. شواهد قانع كننده نشان مي‌دهد كه فاكتور رشد اندوتليال عروقي (VEGF) به‌دليل نقش ضروريش در رگزايي يك هدف مهم براي درمان سرطان مي‌باشد. در اين مطالعه قطعات مختلف نانوباديAnti-VEGF (Nb42) به‌طور موقت تحت كنترل راه‌انداز قوي ويروسي در گياه كدو با استفاده از ناقل ويروسي مبتني بر ZYMV بيان گرديد. اين قطعات شامل توالي معمولي نانوبادي (Nb42I) و توالي بهينه شده نانوبادي براي بيان در گياه (Nb42II) بودند. پس از مايه‌كوبي گياهان، حضور رونوشت‌هاي قطعات مختلف ژني Nb42 در گياهان مايه‌كوبي شده كدو با استفاده از آزمونRT-PCR شناسايي گرديد. همچنين بيان پروتئين نوتركيب با استفاده از آزمون‌هاي لكه‌گذاري نقطه‌اي، SDS-PAGE، لكه‌گذاري وسترن و الايزا تائيد گرديد. بر اساس نتايج الايزا، ميزان بيان نانوبادي Nb42Iو Nb42II به ترتيب 2 و 6/8 ميكروگرم در هر گرم بافت برگي بود. در مجموع، نانوبادي نوتركيب Nb42 ميتواند به‌طور موثر در گياه كدو بيان گردد و سيستم بياني مبتني بر ZYMV يك سيستم توليدي مناسب براي بيان پروتئين‌هاي نوتركيب در گياهان خانواده كدوئيان خواهد بود.
عنوان نشريه :
بيوتكنولوژي كشاورزي
عنوان نشريه :
بيوتكنولوژي كشاورزي
