ارزيابي بيان افتراقي ژن هموسپرميدين سينتاز ۱ (HSS1) در بافت‌هاي مختلف گياه دارويي زلف پير (Senecio vulgaris L.)

هدف: اولين آنزيم مسير اختصاصي بيوسنتز آلكالوئيدهاي پيروليزيديني (PA)، هموسپرميدين سينتاز (HSS) است. HSS انتقال NAD1 وابسته به يك گروه آمينوبوتيل اسپرميدين را به پوترسين كاتاليز ميكند. پوترسين، اسپرميدين و اسپرمين سه پلي‌آميني هستند كه بطور طبيعي داراي بار مثبت بوده و تقريبا در تمام سلولهاي زنده يافت مي‌شوند. اين تركيبات به DNA متصل شده و در تعدادي از فرآيندهاي حياتي مانند تقسيم سلولي، تمايز و عملكرد غشاء دخالت دارند. گزارشهاي بسيار اندكي در مورد بيان ژن هموسپرميدين سينتاز ۱ (HSS1) در گياه دارويي زلف پير (Senecio vulgaris) به خصوص در شرايط طبيعي گزارش شده است. هدف از پژوهش حاضر بررسي بيان ژن هموسپرميدين سينتاز ۱ در بافت هاي مختلف گياه دارويي زلف پير (S. vulgaris) با استفاده از PCR در زمان واقعي بود. مواد و روش‌ها: RNA كل از ريشه‌ها، شاخساره‌ها (ساقه‌ها و برگ‌ها) و گل‌ها استخراج شد و به cDNA تبديل شد. آغازگرهاي اختصاصي براي ژن HSS1 و نيز براي Pol II (به عنوان ژن خانه دار مرجع در آزمايش)، طراحي شد و بيان نسبي ژن با استفاده از روش پي سي آر در زمان واقعي بررسي شد. نتايج: منحني ذوب دو ژن نشان دهنده تكثير اختصاصي در PCR بود. ارزيابي سطح بيان نرمال شده ژن HSS1 نشان داد كه اين ژن به صورت متفاوتي در اندام‌هاي مختلف S. vulgaris بيان شده است. حداكثر بيان نسبي (تغييرات بيش از 59 برابر نسبت به ژن مرجع Pol II) در ريشه هايي كه هموسپرميدين سينتاز فعال است و هموسپرميدين توليد ميشود مشاهده شد. علاوه بر آن اين ژن در گلها نيز به ميزان كمتري (افزايش ۴ برابر نسبت به ژن خانه‌دار Pol II). بيان شد. طبق انتظار، اين ژن بيان نسبي قابل توجهي در شاخساره‌ها يعني جايي كه هموسپرميدين حمل ميشود، نشان نداد. نتيجه‌گيري: بيان ژن HSS1 در گياه زلف پير به صورت ويژه بافتي است و در ريشه‌ها بيشتر از ديگر بافت‌ها مي‌باشد.