محلول سازي و تا خوردگي مجدد اجسام اينكلوژن پروتئين نو تركيب پوششي ويروس برگ باد بزني مو توليد شده در Escherichia coli

هدف: سطوح بالاي بيان ژن‌ هاي خارجي در سلول‌ هاي ميزبان به ويژه در باكتري‌ ها اغلب منجر به تشكيل اجسام اينكلوژن مي شود. وجود اسيد آمينه سيستئين در ساختار پروتئين ها به تشكيل اين اندامك نيز كمك مي كند. پيوند هاي دي سولفيدي درون و بين مولكول هاي پروتئين غني از سيستئين پوششي ويروس برگ باد بزني مو باعث تشكيل اجسام اينكلوژن پس از بيان در Escherichia coli مي شود. از اين رو به منظور به دست آوردن پروتئين نو تركيب با ساختار طبيعي، ضروري است پروتئين هاي توليد شده در سلول باكتري به شكل محلول در آيند. مواد و روش: در مطالعه حاضر براي تا خوردگي مجدد ساختار پروتئين ها از حلال آمفي پاتيك 2 متيل 2،4پنتان ديول (MPD) در حضور سديم دو دسيل سولفات (SDS) استفاده شد. به اين منظور ابتدا اجسام اينكلوژن حاوي پروتئين پوششي نا محلول ويروس برگ باد بزني مو با استفاده از عامل دناتوره كننده سديم دو دسيل سولفات محلول شد. سپس پروتئين پوششي محلول با استفاده از روش كروماتوگرافي اندازه خالص سازي شد و در نهايت پروتئين هاي پوششي خالص با استفاده از روش MPD/SDS تا خورده شد-ند. نتايج: تصاوير ميكروسكوپ الكتروني عبوري تا خوردگي مجدد ذرات شبه ويروسي برگ باد بزني مو را تاييد كرد. نتيجه گيري: به نظر مي رسد حلال MPD سبب تعديل خواص دناتوره كننده سديم دو دسيل سولفات شده و به اين ترتيب روشي ساده، كار آمد و موثر براي تا خوردگي مجدد پروتئين پوششي غني از سيستئين ويروس برگ باد بزني مو معرفي شد.