القاء اثرات آپوپتوتيك و ضدتكثيري در سلول‌هاي REH متعاقب مهار رسپتور نوركينين-1 توسط Aprepitant

Induction of apoptotic and anti-proliferative effects in REH cells upon neurokinin-1 receptor inhibition using Aprepitant

هدف: به دنبال معرفي مسير پيام‌رساني NK1R به عنوان يك مسير كارسينوژنيك، مطالعات زيادي، فعاليت غيرطبيعي اين مسير را در بسياري از بدخيمي‌هاي انساني گزارش كرده‌اند. بر اساس اهميت قابل توجه مسير NK1R در پاتوژنز لوسمي لنفوبلاستيك حاد (Acute Lymphoblastic Leukemia) (ALL)، هدف اين مطالعه بررسي تاثير مهاركننده غيرپپتيدي و رقابتي ) NK1R (Aprepitant، ا بر رده سلولي REH، مشتق شده از لوسمي لنفوبلاستيك حاد بود. مواد و روش‌ها: براي بررسي اثر آنتي‌لوسميك آنتاگونيست NK1R، سلول‌هاي REH با دوزهاي مختلفي از Aprepitant تيمار گشتند و سپس درصد زنده‌ماني، ميزان تكثير سلولي و فعاليت متابوليك آن‌ها مورد ارزيابي قرار گرفت. علاوه بر اين، به منظور مشخص كردن تاثير دارو بر پيشرفت چرخه سلولي و القاء آپوپتوز، رنگ‌آميزي Annexin-V/PI و آناليز محتواي DNA سلولي صورت گرفت. در انتها، ميزان تغيير فعاليت رونويسي ژن‌هاي مرتبط با آپوپتوز توسط تست RQ-PCR مورد ارزيابي قرار گرفت. يافته‌ها: ما دريافتيم كه مهار مسير پيام‌رساني NK1R داراي اثرات سايتوتوكسيك و آنتي‌پروليفراتيو در رده سلولي REH از طريق افزايش خروج فسفاتديل سرين، افزايش جمعيت سلولي در فاز G1 و كاهش زنده‌ماني سلول‌هاي تيمار‌شده با Aprepitant مي‌باشد. علاوه بر اين، نتايج ما نشان داد كه آپوپتوز القاء‌شده توسط Aprepitant در اين رده سلولي احتمالاً از طريق تغيير نسبت بيان ژن‌هاي آنتي‌آپوپتوتيك و پروآپوپتوتيك، Bax و Bcl-2، صورت مي‌گيرد. نتيجه‌گيري: اين مطالعه تاثير ضد لوسميك Aprepitant را در رده سلولي Pre-B ALL آشكار كرده و توانايي اين دارو را در القاء آپوپتوز مشخص مي‌سازد.

Introduction: Following the first description of neurokinin-1 receptor (NK1R) network as a carcinogenic pathway, overwhelming numbers of studies have reported the inappropriate activity of this cascade in a wide assortment of human cancers. On the basis of the principal importance of NK1R in the pathogenesis of acute lymphoblastic leukemia (ALL), it was of great interest to dissect the effect of Aprepitant, a competing non-peptide NK1R antagonist, on REH Pre-B ALL cells. Materials and Methods: To evaluate the anti-leukemic effect of NK1R antagonist, REH cells were exposed to the increasing concentrations of Aprepitant and subsequent cell viability, growth kinetics, and metabolic activity were investigated. Moreover, to underscore whether Aprepitant-induced cytotoxic effect could be attributed to either induction of apoptosis or cell cycle arrest, Annexin-V/PI staining and DNA content analysis were performed. Finally, the transcriptional alterations of apoptosis-related target genes were studied using RQ-PCR. Results: Intrestingly, we found that abrogation of the NK1R signaling pathway exerts cytotoxic and antiproliferative effects against REH cells, as evidenced by the increased externalization of phosphatidyl serine (PS), elevated G1 cell population, and decreased number of inhibitor-treated viable cells. In addition, our results also suggested that Aprepitant-induced apoptotic cell death in REH cells is mediated, at least partially, through shifting the ratio of death promoters to death repressors via alteration of Bax and Bcl2 expression. Conclusion: This study highlighted the potent efficacy of Aprepitant in Pre-B ALL cells and shed light on proapoptotic property of this inhibitor.