بررسي ميزان بيان ژن هاي PTEN و AKT1 در كشت هم جوار سلول هاي سرطاني كولون HT29 با باكتري استرپتوكوكوس ترموفيلوس

The study of expression of PTEN and AKT1 genes in co-culturing of HT29 colon cancer cell line with Streptococcus thermophilus

سابقه و هدف سرطان كولون از سرطان هاي رايج در جهان مي باشد. پروبيوتيك ها ميكروارگانيسم هاي زنده و مفيدي هستند كه با تاثير بر آنزيم هاي گوارشي حيوانات و انسان ها، مهار عوامل سرطان زا در داخل بدن و شرايط آزمايشگاهي، سركوب لوسيون ها و تركيبات القا كننده سرطان و تومورها در حيوانات آزمايشگاهي نقش موثري در جهت مقابله با سرطان ايفا مي كنند. هدف مطالعه حاضر بررسي مسير سيگنالينگ سلولي PTEN/AKT1 در كشت همجوار باكتري استرپتوكوكوس ترموفيلوس با سلول هاي سرطاني كولون HT29 مي باشد. مواد روش ها از كشت باكتري ها، مايع رويي و عصاره باكتريايي تهيه شده سلول هاي سرطاني كولون HT29 توسط اين مواد تيمار شدند. نكروز سلولي با روش MTTبررسي گرديد. همچنين، ميزان بيان ژن هايPTEN و AKT1 در رده سلولي HT29با استفاده از روش Real Time PCR مورد بررسي قرار گرفت. نتايج باكتري استرپتوكوكوس ترموفيلوس ميزان بيان ژن AKT1 را كاهش داده، بيان PTEN را افزايش داده و سلول هاي سرطاني را به سمت آپوپتوز برد. آزمايش MTT نشان داد كه غلظت 0/05= OD بيشترين كشندگي طي 4 ساعت را دارد. نتيجه گيري مي توان از باكتري استرپتوكوكوس ترموفيلوس جهت ايجاد يك راه كار نوين درماني با تاثير بالا، عوارض جانبي پايين، بي خطر از نظر بيولوژيكي و هزينه كمتر و يا به عنوان درمان جانبي متناسب با فلور طبيعي بدن براي درمان و همچنين پيشگيري از سرطان كولون بهره برد.

Background: Colon cancer is one of the most common cancers in the world. Probiotics are viable and useful microorganisms that have an effective role in controlling cancer by influencing the digestive enzymes of animals and humans, inhibition of cancerous agents in the body and in vitro conditions, suppression of lotions, and cancer-inducing compounds and tumors in experimental animals. The present study was conducted to investigate the PTEN/ AKT1 cellular signaling pathway in adjacent cultures of Streptococcus thermophilus with HT29 colon cancer cells. Materials and Methods: Bacterial culture, supernatant and bacterial extract were prepared and the cells were treated with these materials. Cell necrosis was evaluated by the MTT method. Also, the expression of PTEN and AKT1 genes in HT29 cell line was investigated using the real-time PCR. Results: The results showed that the thermophiles bacterium reduced the expression of AKT1 genes, and increased the expression of PTEN and led the cancerous cells toward apoptosis. The MTT test showed that the concentration of OD=0.05 had the highest mortality in 4 hours. Conclusion: Thermophiles bacteria can be used to create a novel therapeutic effect with high impact, low side effects, harmless biological effect and lower costs. Also, it can be used as an extra treatment appropriate to the body's natural flora for the treatment and prevention of colon cancer.