بررسي ارتباط بين سنتز پروتئين‌هاي P‌21 و cyclin D1 و اندازه‌گيري پارامترهاي هيستومورفومتريك بافت بيضه موش در مواجهه با آفلاتوكسينG1

Relationship between synthesis of P21 and Cyclin D1 proteins and histomorphometric parameters of mice testicular tissue in presence of Aflatoxin G1

هدف: در ميان انواع آفلاتوكسين‌ها، بعد از آفلاتوكسينB1، آفلاتوكسينG1 مهم‌ترين نوع بوده و به ميزان بسيار زيادي در غلات و حبوبات يافت شده است. آفلاتوكسين توليد وكيفيت اسپرم را پايين مي‌آورد. اين مطالعه جهت بررسي تأثير آفلاتوكسينG1 بر روند اسپرماتوژنز، اسپرميوژنز و اثر آن بر سنتز پروتئين‌هايP21 و cyclin D1 در بافت بيضه طراحي گرديد. مواد و روش‌ها: 24 سرموش سوري نر به طور تصادفي به 4 گروه (كنترل و 3 گروه آزمايشي) تقسيم شدند. گروه كنترل كه فقط ml2/0 روغن ذرت به شكل داخل صفاقي دريافت نمودند. گروه‌هاي آزمايشي كه AFG1 را به ميزان (µg20) در روزهاي 7, 15 و 35 دريافت كردند. متعاقب 7، 15، 35 روز نمونه‌هاي بافت بيضه برداشته و پس ازتهيه مقاطع بافتي و رنگ‌آميزي هماتوكسيلين- ائوزين، پارامترهاي هيستومورفومتريك و ايمنوهيستوشيمي پروتئين‌هايP21 و cyclin D1 مورد بررسي قرار گرفت. يافته‌ها: نتايج اين مطالعه نشان داد كه قطر لوله‌هاي اسپرم‌ساز و ضخامت اپيتليوم ژرمينال در گروه‌هاي آزمايشي به طور معني‌دار (05/0>P) كاهش يافته كه وابسته به زمان بوده است. درصد لوله‌هاي اسپرم‌ساز با ضرايب تمايزي، جايگزيني لوله‌اي و هم‌چنين اسپرميوژنز منفي در موش‌هايي كهAFG1 را دريافت كردند، افزايش يافته بود. تزريقAFG1 در موش‌هاي گروه‌هاي آزمايشي منجر به افزايش سنتز پروتئين‌هايP21 و cyclin D1 گرديد. نتيجه‌گيري: مطالعه حاضر نشان داد كه AFG1 با افزايش ميزان سنتز پروتئينCyclin D1 و پروتئينp21 روند تقسيم سلولي را دچار اختلال كرده است كه به نوبه‌ي خود در روند اسپرماتوژنز نيز اختلال ايجاد نمود و با كاهش ضرايب جايگزيني، تمايز و اسپرميوژنز در بافت بيضه، در نهايت توليد و كيفيت اسپرم را كاهش داد.

Introduction: AFG1 after B1 is the most important aflatoxin found in beans and grains. Remarkably, aflatoxin cause a decrease in production and quality of sperm. In the current study, the effect of AFG1 on spermatogenesis, spermiogenicity, synthesis of P21 and cyclin D1 proteins in testicular tissue was investigated. Materials and Methods: 24 male albino mice were divided into 4 groups; control group intraperitoneally received 0.2 ml corn oil and experimental groups received AFG1 (20 μg) for 7, 15, and 35 days, respectively. After 7, 15 and 35 days, the testicular tissue samples were taken, and after preparing tissue sections, hematoxylin and eosin (H&E) staining was performed. Histomorphometric parameters and the immunohistochemical analysis of proteins of P21 and cyclin D1 were investigated. Data analysis was carried out using one-way ANOVA at the significance level of p<0.05. Results: The results of this study showed that the diameter of the spermatozoa tubes and the thickness of the germinal epithelium in the experimental groups significantly decreased (P <0.05), which was time dependent. The percentage of semen tubes with differentiation coefficients, tubular replacement as well as negative spermiogenesis increased in mice receiving AFG1. Conspiciously, injection of AFG1 in experimental group mice resulted in increased synthesis of P21 and cyclin D1 proteins. Conclusion: AFG1 interrupted cell division by increasing the amount of protein synthesis of Cyclin D1 and P21 protein, which in turn could be a disorder in the process of spermatogenesis. However, increase differentiation indices, tubular differentiation, and spermiogenesis in testicular tissue, which consequently lead to a decrease in sperm production and quality.