بررسي هيستومورفومتري بورس فابريسيوس و رديابي ايمونوهيستوشيميايي p53 و كاسپاز سه در جوجه هاي گوشتي متعاقب تنش فيزيولوژيك و ارزيابي اثر محافظتي مكمل كروم

Histomorphometrical evaluation of Bursa of Fabricius and Immunohistochemistry Tracing of P53 and Caspase3 in broiler following physiological stress and protective effect of chromium supplement

هدف از اين مطالعه، ارزيابي كارايي مكمل كروم در برابر آسيب‌هاي ناشي از تنش فيزيولوژيك و بررسي روند آپوپتوز در بافت لنفاوي بورس فابريسيوس جوجه‌هاي گوشتي به واسطه ارزيابي ايمونوهيستوشيمي پروتئين‌هاي p53 و كاسپاز 3 بود. به همين منظور از 320 قطعه جوجه نر سويه تجاري راس، در يك آزمايش فاكتوريل 4×2 با دو سطح تنش (بدون تنش و تنش) و چهار سطح كروم از منبع كروم- متيونين(صفر، 1000، 2000 و 3000 ميكروگرم در كيلوگرم جيره) در قالب طرح كاملاً تصادفي با چهار تكرار و 10 قطعه پرنده در هر تكرار استفاده شد. تنش فيزيولوژيك با افزودن دگزامتازون به جيره در دوره سني 24-17 روزگي القاء گرديد. در انتهاي دوره پرورش، پرنده‌هاي گروه‌هاي مختلف آسان‌كشي شدند و از بورس فابريسيوس نمونه‌برداري گرديد و نمونه‌ها مورد ارزيابي هيستوموفومتري و ايمونوهيستوشيمي قرار گرفت. القائ تنش فيزيولوژيك، موجب تغيير در قطر كورتكس و مدولاي فوليكول‌هاي لنفاوي بورس فابريسيوس در گروه‌هاي آزمايشي گرديد. بر اساس نتايج حاصل، افزايش سطح كروم جيره با استفاده از مكمل كروم- متيونين ، اثرات منفي تنش بر بافت لنفاوي بورس فابريسيوس جوجه‌هاي گوشتي را كاهش مي دهد. همچنين تنش فيزيولوژيك ميزان بيان پروتئينp53 و كاسپاز3 را در بافت لنفاوي بورس فابريسيوس افزايش داد(05/0P<). با افزايش سطح كروم در جيره، ميزان بروز اين پروتئين‌ها كاهش يافت(05/0P<).

The purpose of present study was to examine the protective effect of chromium supplement against damages which is induced by physiological stress and evaluation of apoptosis in Bursa of Fabricius of broilers through Immunohistochemical tracing of p53 and caspase-3 proteins. in this experimental study, 320 male Ross broilers were used. This study was designed as a 2 x 4 factorial, with two stress levels (under stress and stress free) and four levels of chromium-methionine supplement (0, 1000, 2000 and 3000ppb) in diet, which distributed into 4 accidental repeated groups of 10 each. stress was induced by adding dexamethasone to the diet, during 17 to 24 days of age. At the end, broilers in all groups were euthanized and the samples that includes Bursa of Fabricius were obtained then pathological and immunohistochemical parameters were evaluated. Physiological stress caused significant changes in medulla and cortex in lymphatic follicle of Bursa of Fabricus. Based on this study, Chromium-methionine supplementation could ameliorate the effects of Physiological stress in Bursa of Fabricius. Physiological stress caused significant increases in p53 and caspase-3 expression levels in Bursa of Fabricius (P<0/05). Chromium-methionine administration markedly reduced the expression levels of p53 and caspase-3 after inducing physiological stress (P<0/05).