رديابي بيماري كوي هرپس ويروس (KHVD) در برخي مزارع كپورماهيان كشور: مطالعه مولكولي و آسيب‌شناسي

Study of Koi Herpes Virus Disease (KHVD) in Some Carp farm of Iran: A Molecular and Pathological Study

بيماري كوي هرپس ويروس، سبب ايجاد يك ويرمي حاد با تلفات تا 100 درصد در كپورماهيان مي‌شود. با توجه به بروز تلفات هر ساله و قابل توجه در مزارع كپور ماهيان پرورشي به ويژه مزارع استان خوزستان، احتمال ويروسي بودن بيماري در اين مزارع وجود دارد. لذا هدف از اين مطالعه، امكان شناسايي ويروس عامل KHVD در اين مزارع بوده است. با مراجعه به 14 مزرعه درگير در طي سال‌هاي 94-95، در صورت بروز تلفات، بلافاصله ماهي كالبدگشايي و از بافت­هاي آبشش و كليه هر كدام يك گرم نمونه اخذ و در الكل 80 درصد قرار داده ‌شد و پس از برچسب‌گذاري براي پروسه­ي آزمايشگاهي به آزمايشگاه انتقال داده شد و به روش Nested PCR (كيت IQ2000) مورد مطالعه قرار گرفت. براي مطالعه­ي آسيب‌شناسي از بافت‌هاي آبشش، كليه، كبد، مغز، قلب و روده چهار گونه كپور پرورشي نمونه‌گيري و از فرمالين 10 درصد استفاده شد. نتايج حاصل از PCR براي تعداد 7 نمونه از نمونه‌هاي مورد آزمايش در استان­هاي خوزستان و گيلان با ايجاد باندهاي 229 و يا 440 bp براي بيماري KHV مثبت تشخيص داده شد. در مطالعات آسيب‌شناسي مقاطع بافت آبشش، هايپرپلازي سلول‌هاي اپيتيليوم پوششي لاملاهاي ثانويه به همراه نفوذ سلول‌هاي التهابي اغلب تك‌هسته‌اي (به ويژه لنفوسيت‌ها) در اغلب مقاطع بافتي مشاهده شد. همچنين در تعدادي از مقاطع بررسي شده، نكروز شديد سلول‌هاي اپيتليوم پوششي لاملاهاي آبششي ديده شد. در بررسي مقاطع بافتي، كليه در اغلب مقاطع، ساختار طبيعي داشته و فقط در تعداد كمي از توبول‌هاي ادراري به ويژه توبول‌هاي پروگزيمال، تورم سلولي در اپيتيلوم پوششي ديده شد. گنجيدگي‌هاي داخل هسته‌اي در تعدادي از سلول‌هاي بافت مغز، قلب و روده به صورت كروماتين مارژينه مشاهده شد. نتايج به دست آمده از اين مطالعه نشان مي­دهد كه برخي مزارع كپورماهيان كشور در استان­هاي خوزستان و گيلان، مبتلا به بيماري KHVD بوده كه مي‌تواند يكي از عوامل دخيل در ايجاد سندرم تلفات تابستانه­ي كپور ماهيان محسوب شود.

Koi herpesvirus (KHV) is a highly contagious virus that causes significant mortality up to 100% in carp varieties. Considering the annual and significant casualties in carp farms, especially in Khuzestan province farms, there is a possibility of viral disease in these farms. The aim of this study was to detect the virus that causes KHVD in these farms. By referring to 14 farms with casualties during the years 2015-2016, fish were immediately slaughtered. Gill and kidney tissue samples were taken for one gram of sample and placed in 80% alcohol, and labeled for laboratory process, and transferred to the laboratory. Then by Nested PCR (Kit IQ2000) were studied. To study the pathology of gills, kidneys, liver, brain, heart and intestines samples were taken from four species of carp (common carp, grass carp, bighead carp and silver carp) and 10% formalin was used. The results of the PCR for 7 samples of the tested specimens in the provinces of Khuzestan and Gilan by creating bands 229 and / or 440 bp positive for KHV disease was diagnosed. In the pathological studies of gill tissue, epithelial hyperplasia of the secondary lamella enclosure with the infiltration of inflammatory cells, often single-nuclei (especially lymphocytes), was observed in most tissue sections. Also, in a number of examined sections, acute necrotic lesions of epithelium cells were observed. In the study of the kidney tissues, most sections of the normal structure were present and only in a small number of urinary tubules, especially proximal tubules, cellular swelling was observed in the epithelium. Intranuclear inclusion body was observed in a number of brain, heart and intestinal cells in the form of marginal chromatin. The results of this study indicate that some carp farm of Iran has been affected by KHV disease, which can be considered as one of the factors contributing to the occurrence of summer mortality syndrome in carp.