عنوان مقاله :
اثرات سطوح مختلف قند رافينوز و رقيقكنندههاي مختلف بر خصوصيات مني قوچ دالاق پس از انجماد و يخگشايي
عنوان به زبان ديگر :
The effect of different levels of raffinose and different extenders on characteristics of Dalagh ram semen after freezing and thawing
پديد آورندگان :
پهملي، سولماز دانشگاه گنبد - دانشكده كشاورزي , مصطفي لو، يوسف دانشگاه گنبد - دانشكده كشاورزي , مسلمي پور، فريد دانشگاه گنبد - دانشكده كشاورزي , محمد قره باش، آشور دانشگاه گنبد - دانشكده كشاورزي
كليدواژه :
قوچ , باروري , رقيقكننده مني , رافينوز , محافظت سرمايي
چكيده فارسي :
سابقه و هدف: يكي از فناوريهاي مهم براي نگهداري ذخاير ژنتيكي، انجماد مني است. از آنجايي كه انجماد باعث كاهش باروري اسپرم ميشود، افزودن موادي به مني كه باروري آن را حفظ كند، مهم ميباشد. از ابتداي بكارگيري تكنيك تلقيح مصنوعي، رقيقكنندههاي مختلفي جهت نگهداري مني در شرايط مايع و انجماد استفاده شده است. بنابراين هدف اين پژوهش، بررسي افزودن سطوح مختلف رافينوز و رقيقكنندههاي شير، تريس-زرده تخممرغ و تريس-لسيتين سويا بر ويژگيهاي مني قوچ پس از انجماد و يخگشايي بود.
مواد و روشها: نمونههاي مني از چهار رأس قوچ دالاق بالغ جمعآوري و در رقيقكنندههاي مختلف، رقيقسازي شدند و سپس رافينوز افزوده شد. نمونههاي مني در پايوتهاي نيم ميليليتري شدند و به مدت 150 دقيقه در دماي 4 درجه سانتيگراد خنك و سپس در نيتروژن مايع منجمد گرديدند. پايوتهاي منجمد شده براي ذخيرهسازي به تانك حاوي نيتروژن منتقل شدند. پس از يخگشايي فراسنجههاي كيفي اسپرماتوزوآ ﺷﺎﻣﻞ درﺻﺪ تحرك اسپرم، زندهماني، سلامت غشاء و اسپرم طبيعي ﻣﻮرد ارزﯾﺎﺑﯽ ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺘﻨﺪ. اين آزمايش در قالب آزمايش فاكتوريل 3×4 با آرايش كاملا تصادفي انجام شد. تيمارها شامل چهار سطح رافينوز (صفر، 60، 70 و 80 ميليمولار) و سه نوع رقيقكننده (شير، تريس-زرده تخممرغ و تريس-لسيتين سويا) بودند. دادههاي به دست آمده از اين پژوهش با استفاده از نرم افزار آماري SAS (مدل 1/9) با رويه ANOVA مورد تجزيه و تحليل قرار گرفتند. مقايسه ميانگين دادهها توسط آزمون توكي در سطح خطاي 1 درصد انجام شد.
يافتهها: نتايج نشان داد كه تأثير افزودن رافينوز بر تحرك و زندهماني اسپرم معنيدار بود (0/01>P). ولي بر درصد سلامت غشاء و درصد اسپرم با مورفولوژي طبيعي تاثير معنيدار نداشت. تأثير رقيقكنندهها بر درصد تحرك، زندهماني، سلامت غشاء و اسپرم با مورفولوژي طبيعي معنيدار بود (0/01>P). اثر متقابل سطوح رافينوز و رقيقكنندهها بر درصد تحرك، سلامت غشاء و مورفولوژي طبيعي اسپرمها معنيدار بود ولي بر درصد زندهماني تاثير معنيدار نداشت. بيشترين تحرك اسپرم (2/09±35/00 درصد) در رقيقكننده تريس-زرده تخممرغ حاوي 60 ميليمولار رافينوز به دست آمد. بيشترين زندهماني اسپرم (1/88±74/40 درصد) در سطح 80 ميليمولار رافينوز بود ولي بيشترين درصد سلامت غشاء (2/60±66/40 درصد) در رقيقكننده زرده تخممرغ حاوي صفر ميليمولار رافينوز مشاهده شد. بيشترين درصد اسپرم طبيعي (2/82±74/80 درصد) در رقيقكننده تريس-لسيتين سويا حاوي 60 ميليمولار رافينوز به دست آمد.
نتيجهگيري: يافتههاي تحقيق نشان داد كه خصوصيات اسپرم شامل درصد تحرك و اسپرم طبيعي در سطح 60 ميليمولار رافينوز، سلامت غشاء در تيمار شاهد و زندهماني در سطح 80 ميليمولار بهتر حفظ شد. از طرفي، رقيقكننده تريس-زرده تخممرغ نسبت به شير و تريس-لسيتين سويا تاثير بيشتري بر حفظ ويژگيهاي اسپرم قوچ داشت.
چكيده لاتين :
Background and objectives: One of the pivotal technology for genetic resorviors preservation is the freezing of semen. As freezing causes a reduction in sperm fertility, adding some components to semen to preserve its ferility would be important. Since beginning the time of artificial insemination technique, different diluents have been used to preservation semen in liquid and frozen condition. Therefore, the goal of this stady was to investigate the effect of adding different levels of raffinose and milk, Tris-chicken egg yolk and Tris-soybean lecithin extenders on ovine semen characteristics after freezing and thawing.
Materials and methods: Samples were collected from four mature Dalagh rams and extended by different extenders and then raffinose was added. Semen samples were aspirated into 0.5 ml straws and cooled to 4°C within 150 min and then frozen in liquid nitrogen Frozen straws were transferred to a tank containing liquid nitrogen. After thawing spermatozoa quality parameters including percentage of sperm motility, viability, membrane integrity and sperm normality were evaluated. This study was performed in a 4×3 factorial experiment with a completely randomized arrangement. Treatments were four levels of raffinose (0, 60, 70 and 80 mmol) and also three kinds of extenders (milk, tris-egg yolk and tris-soy lecithin). The obtained data from this study were analyzed by ANOVA procedure of Statistical Analysis System SAS (version 9.1). Comparison of data means were performed by Tukey test at the level of %1 error.
Results: Results showed that adding raffinose had a significant effect on sperm viability and mobility (P<0.01), but did not significantly affect on sperm memberane integrity and normal morphology percentages. Effect of extender on percentages of motility, viability, membrane integrity and normal morphology of sperms was significant (P<0.01). The interaction between raffinose levels and extenders on percentages of motility, membrane integrity and normal morphology of sperms was significant while it was not for viability percentage. The greatest sperm mobility (35.00±2.09%) was in tris-egg yolk extender containing 60 mmol raffinose while that greatest sperm viabilty (74.40±1.88%) was in tris-egg yolk extender containing 80 mmol raffinose but also the most percentages of membrane integrity (66.40±2.60%) was in Tris-chicken egg yolk containing 0 mM raffinose. The greatest sperm normal morphology (74.80±2.82%) was observed in tris-soy lecithin extender containing 60 mmol raffinose.
Conclusion: Findings of the study showed that sperm characteristics including mobility and normal morphology percentages in level 60ml raffinose, membrane integrity percentages in level 0ml raffinose wihle for viability percentage were better preserved in 80ml level. In the other hand, tris-egg yolk extender had more prominant effect on preservation of sperm characteristics.
عنوان نشريه :
پژوهش در نشخواركنندگان
عنوان نشريه :
پژوهش در نشخواركنندگان