بررسي اثرات عصاره گياه زيرفون (Tilia plathyphyllos) بر بيان ژن‌ كاسپاز‌هاي 3 و 9 در رده سلول سرطاني غدد پستاني سگ (CF41.Mg)

سرطان پستان در سگ و گربه بعد از تومورهاي پوستي، شايع ترين نوع سرطان مي باشد. هرگونه اختلال در روند آپوپتوز سبب ايجاد و رشد سلول هاي سرطاني مي شود. كاسپازهاي 3 و 9 به عنوان كاسپازهاي اجرايي و القاگر نقش مهمي در فرآيند آپوپتوز دارند. اين مطالعه به منظور بررسي اثر عصاره گياه زيرفون بر بيان ژن كاسپاز هاي 3 و 9 در رده سلول سرطاني غدد پستاني سگ انجام شد. سلول هاي سرطاني غدد پستاني سگ (cf41.mg) در مجاورت دوزهاي 5، 10، 25، 50 و100 ميكرومولار از عصاره زيرفون در محيط كشت به مدت 24، 48 و 72 ساعت پاساژ داده شدند. جهت بررسي ميزان سلول هاي زنده پس از انجام پاساژ از روش MTT  (microculture tetrajolium test) استفاده شد. براي فهم مكانيسم هاي درگير در القاي مرگ سلولي در زمان هاي مذكور،RNA  استخراج و CDNA  سنتزشده و ميزان بيان ژن كاسپاز هاي 3 و 9  با استفاده از پرايمرهاي  مختص به آنها به روشreal time PCR   و RTPCR مورد بررسي قرار گرفتند. فعاليت ضدسرطاني اين عصاره پس از 48 ساعت و با دوز 25 ميكرومولار بيشترين تاثير را داشت. نتايج آزمونRT-PCR  حاكي از بيان ژن كاسپاز هاي 3 و 9 در نمونه هاي تيمارشده در زمان هاي 24، 48 و 72 ساعت بود. همچنين ميزان بيان ژن كاسپاز 3 در دوزهاي 10 و 100 ميكرومولار و بيان كاسپاز 9 در دوز10 ميكرومولار بيشتر از بقيه بود. نتايج حاصل از اين مطالعه تأييد كننده اثر مهاري عصاره  گياه زيرفون بر تكثير رده سلول هاي سرطاني غدد پستاني سگ (cf41.mg) مي باشد.