نقش حفاظتي عصاره رازيانه بر كيفيت اسپرم منجمد يخ -گشايي شده قوچ قزل

Protective effects of fennel (Foeniculum vulgare) extract on frozen-thowed sperm of Ghezel ram

با كمك انجماد مني مي‌توان اسپرم را براي مدت طولاني ذخيره كرد، اما تغييرات به­وجود آمده در طي انجماد مني مي‌تواند باعث تنش اكسيداتيو شده و باعث كاهش قدرت باروري آن گردد. هدف از مطالعه حاضر بررسي تاثير عصاره آبي گياه رازيانه بر پارامترهاي كيفي اسپرم قوچ بعد از فرآيند انجماد-يخ­گشايي مي­باشد. براي اين منظور از 5 رأس قوچ قزل با سن 4-3 ساله هفته‌اي 2بار براي مدت 4هفته اسپرم­گيري شد. نمونه‌‌هاي مني در هر بار پس از اطمينان از كيفيت لازم باهم مخلوط شدند. تيمارهاي آزمايشي شامل 7 سطح عصاره رازيانه (شامل 0، 2، 4، 6، 8، 10 و 12 ميلي‌ليتر بر دسي­ليتر رقيق­كننده) بودند كه بر نمونه‌هاي مني رقيق شده افزوده شدند. نمونه‌ها براي مدت3 هفته در ازت مايع انجماد و نگه­داري شدند. پس از يخ­گشايي فراسنجه­هاي حركتي اسپرم، يك­پارچگي غشاي پلاسمايي و پراكسيداسيون ليپيدهاي غشايي اسپرم مورد ارزيابي قرار گرفتند. آناليزآماري نشان داد كه عصاره رازيانه با اثرات آنتي‌اكسيداني باعث كاهش اكسيداسيون ليپيدي غشاي اسپرم در تيمارهاي آزمايشي شد كه در اين ارتباط در گروه 12ميلي‌ليتر كم­ترين غلظت مالون دي‌آلدهيد مشاهده شد كه نسبت به گروه شاهد تفاوت معني‌دار داشت (0/05>P). بررسي فراسنجه‌هاي زنده‌ماني، يك­پارچگي غشايي و پارامترهاي حركتي حاكي از آن بود كه تيمار 6 ميلي‌ليتر نسبت به ساير گروه­هاي آزمايشي به­طور معني‌داري باعث بهبودي شده است (0/05>P). به­نظر مي‌رسد كه به­طوركلي مي‌توان از خاصيت آنتي‌اكسيداني رازيانه جهت كاهش استرس اكسيداتيو پس از انجماد در اسپرم قوچ استفاده كرد و براي اين منظور غلظت 6 ميلي‌ليتر عصاره در دسي‌ليتر رقيق­كننده مناسب است.

Long term sperm storage is major factor of artificial insemination in animal improvement. Nevertheless recovered fertility of frozen–thawed sperm is very important. This experiment was carried out in order to study of antioxidant effects of fennel (Foeniculum vulgare) aqueous extract on the quality of frozen–thawed Ghezel ram semen. After extraction procedure, different levels of fennel extract (0, 2, 4, 6, 8, 10 and 12 ml as experimental groups) were added per deciliter (dl) of extender. After chilling, diluted semen were packaged in 0.5 ml straws and stored in liquid nitrogen for 3 weeks. This experiment was performed with 5 replications (with 10 straws in each replicates) per experimental groups. Evaluation of live sperm using of eosin-nigrosin staining showed addition of 6 ml Fennel extract had higher live sperm than other experimental groups (P<0.05). Plasma membrane integrity was carried out by Hypo Osmotic Test (HOST) that declared the healthiest membrane was observed in 6 ml extract group (P<0.05). There were significant differences among experimental groups in plasma membrane integrity and lowest value was observed in 12 ml extract group (P<0.05). Sperm motility evaluation by CASA declared significantly higher motility in 6 ml extract group versus other groups (P<0.05). Study of oxidative damage showed lower amount of Malondialdehyde (MDA) in 12ml extract group than other groups (P<0.05). Although the results declare the substantial differences among experimental groups but base on this experiment, It seems, use of 6 ml fennel aqueous extract per dl extender, lead to positive effects on frozen-thawed sperm quality.