تعيين ژنوتيپ و شناسايي فيلوژنتيكي اكينوكوكوس گرانولوزوس از بافت هاي پارافيني كيست هيداتيد جراحي شده

Molecular and Phylogenetic Analysis of Human Hydatid Cysts

مقدمه: هيداتيدوزيس از مهمترين بيماريهاي مشترك بين انسان و حيوان است كه توسط مرحله الروي انگل اكينوكوكوس گرانولوزوس ايجاد ميگردد. تاكنون 52 ژنوتيپ مجزا از اين انگل )10-G1 )گزارش شده است. مرحله كيستي در انسان به عنوان ميزبان واسط اتفاق مي افتد. روش كار: اين مطالعه گذشته نگر )5393-5386 )بر روي 92 بيمار، كه با تشخيص قطعي كيست هيداتيك تحت عمل جراحي در بيمارستانها و مراكز آموزشي درماني بجنورد قرار گرفته بودند، انجام گرفت. بررسي پاتولوژيكي نشان داد كه 62 نمونه در اليه زاياي بافت كيست هيداتيك داراي پروتواسكولكس بودند. بعد از استخراج DNA از نمونههاي پارافينه، RFLP-PCR با استفاده از آنزيمهاي محدود كننده I Rsa و II Hep بر روي ژن ITS1 انجام شد. در اين مطالعه بررسي فيلوژنتيكي با استفاده از ژن ميتوكندريايي COX1 مورد بررسي قرار گرفت. يافته ها: نتايج بدست آمده با الگوي برش آنزيمي ژن ITS1 و همچنين ترادف ژن COX1 و رسم درخت فيلوژنتيك نشان ميدهد كه تمامي ژنوتيپ ها G1 يا سويه گوسفندي است. ترادف ها در بانك ژن جهاني با شماره دستيابي KY485993 تا KY486007 قابل دسترسي است. نتيجه گيري: با مطالعه دموگرافيكي و ويژگي ثبت شده بيماران و تعيين ژنوتيپ هاي انگل در استان بر اساس ميزبان، الگوي انتقال گوسفندي مطرح است. كه ميتوان الگوي پيشگيري مناسب را با توجه به زندگي روستايي ارائه داد.

Introduction: Hydatidosis is one of the most common diseases in humans and livestocks caused by the larval stage of Echinococcus granulosus. The hydatid cyst are occurred in different organs of humans as the intermediate hosts. The economic burden of the disease in Iran is very high. Methods: The current retrospective study was conducted from 2007 to the beginning of 2015 in hospitals and health centers of Bojnourd, Iran, on 90 people who underwent surgery for hydatid cyst. In 60 subjects protoscolex was observed in the germ layer tissue of hydatid cyst studied using DNA extraction and molecular phylogenetic methods. Results: A total of 90 patients were enrolled in the current study and followed up for 6 years. Based on the results obtained from enzymatic restriction of ITS1, RsaI, and HpaII, and COX1 sequences, all species isolated in the current study were sheep strain (G1). The COX1 gene sequences were registered in GeneBank with accession numbers KY485993 to KY486007. Phylogenetic analysis of COXI sequences showed the highest likelihood with G1 sheep strain using the maximal likelihood method. Conclusions: Based on the demographic characteristics of the patients, the genotype of the parasite, and host-parasite relationships, the apropriate treatment and tramsmisson pattern are easy to achieve; moreover, proper prevention programs can be performes for rural sectors.