تاثير سيليبينين بر القاءآپوپتوز و مهار رشد سلولي در رده سلولي M CF-7 سرطان پستان

The Effects of Silibinin on the Induction of Apoptosis and Inhibition of Cell Growth in MCF-7 Breast Cancer Cell Line

سابقه و هدف: سرطان پستان يكي از رايج ترين عوامل مرگ و مير ناشي از بدخيمي در زنان است. سيليبينين يك تركيب فلاونوليگنان از گياه خار مريم (Silybum maianum) استخراج شده و ويژگي ضد سرطاني آن در سلول هاي كبدي مورد بررسي قرار گرفته است. در اين مطالعه اثر سيليبينين بر ميزان بيان ژني P53، رشد و آپوپتوز در رده سلولي MCF-7 مورد بررسي قرار گرفته است. مواد و روشها: با كشت سلول هاي MCF-7 در RPMI1640 و تيمار با سيليبينين در غلظت هاي كنترل، 25 الي800 ميكرومول در زمان هاي 24، 48 و 72 ساعت با روش رنگ سنجي M TT( MethylThiazolTetrazolium) ، ميزان رشد سلولي مورد بررسي قرار گرفت. ميزان القاء آپوپتوز به روش فلوسايتومتري با رنگ آميزي Annexin-V بررسي گرديد. ميزان بيان ژن P53 توسط دستگاه Time PCR-Real بررسي شد. در نهايت تجزيه و تحليل آماري توسط نرم افزار Spss ver16 صورت پذيرفت. يافته ها: يافته ها نشان دادند، تاثير مهار سيليبينين در غلظت200 ميكرومول در 24 ساعت بر رشد و نيز القاء آپوپتوز سلولي قابل توجه بود (0/05>P). انكوباسيون با سيليبينين در 48 ساعت IC50 ، برابر با 148ميكرومول نشان داد (0/05>P). داده هاي فلوسايتومتري نشان دادند كه القاء آپوپتوز كاملا مستقل از اثر سيتوتوكسيك سيليبينين بوده است. سيليبينين باعث افزايش بيان ژن P53 همسو با افزايش ميزان آپوپتوز در سلول هاي تيمار شده مي گردد. نتيجه گيري: سيليبينين به صورت وابسته به دوز و زمان باعث كاهش رشد سلولي و القاء آپوپتوز در سلول هاي MCF-7 مي شد. همچنين سيليبينين به صورت وابسته به دوز باعث بيان ژن P53 شد. شواهد نشان مي دهند كه سيليبينين مي تواند به عنوان يك ماده ضد سرطان پستان در راستاي مرگ سلولي از طريق مسير آپوپتوز عمل نمايد.

Background and Objectives: Breast cancer is one of the most common leading causes of cancer–related mortality in women. Silibinin، a natural flavonolignane and the main component of milk thistle (Silybum maianum)، has conventionally been overlooked as anti-hepatotoxic and anti-cancer agent. In this study، we assessed the effects of Silibinin on breast cancer cell viability، growth، apoptotsis and expression level of P53 gene in MCF-7 cells. Materials and Methods: The MCF-7 cells were treated in the medium of RPMI1640 and silibinin (control and 25–800 μM) for 24، 48 and 72 hours. Cell proliferation was assessed by MTT (Methyl-Thiazol-Tetrazolium) assay. The percentage of apoptosis was determined by flow cytometry analysis using Annexin-V fluorecence isothiocyanat (FITC). The fold changes of P53 expression were determined by Real-Time PCR. Results: The results showed the maximum inhibitory effect of silibinin on the inhibition of cell growth and induction of apoptosis at a concentration of 200 μM after 24 hour incubation (p<0.05). Incubation of the cells with silibinin for 48 hours descended IC50 value to 148 μM (p<0.05). The flowcytometric analysis showed that silibinin-induced apoptosis is independent of its cytotoxic effects on the cells. Increase in the percentage of apoptosis was associated with significant increase in P53 mRNA level. Conclusions: Silibinin inhibited cell growth and induced apoptosis in a time-dose depending effect. Furthermore، Silibinin treatment resulted in apoptotic effects on MCF-7 cells. These results sug-gested that Silibinin could be an affective component to induce cell cycle arrest and apoptosis in vitro.