اثرات فلاونوئيد هسپريدين بر بقاي سلولي و آپوپتوز در رده ي سلولي NALM-6

Effect of hesperidin on cell survival and apoptosis of Nalm-6 cell line

سابقه و هدف: هسپريدين به عنوان فراوان ترين فلاونوئيد موجود در مركبات، داراي اثرات ضد سرطاني در برخي از سلول هاي سرطاني از طريق تحريك آپوپتوز و مهار پروليفراسيون مي باشد. در اين مطالعه اثرات هسپريدين در حضور و عدم حضور انسولين بر روي بقا و آپوپتوز سلول هاي Nalm-6، رده اي از سلول هاي لوسمي لنفوبلاستيك حاد كه در برابر شيمي درماني مقاوم هستند، بررسي شده است. مواد و روشها: سلول هاي Nalm-6در محيط كشتRPMI 1640 غني شده با 10% سرم جنين گاوي و 1% پني سيلين-استرپتومايسين كشت داده شدند و سپس اثرات سيتوتوكسيك و آپوپتوتيك هسپريدين در دو غلظت 25 و 50 ميكرو مولار در حضور و عدم حضور انسولسن (100 نانو مولار) و نيز اثرات سيتوتوكسيك و آپوپتوتيك Wortmannin (10 نانو مولار) به ترتيب به روش MTT و الايزا با استفاده از Cell Death Detection ELISA Kit بررسي شد. يافته ها: هسپريدين به صورت وابسته به زمان باعث كاهش بقاي سلول هاي Nalm-6 شد؛ به طوري كه بعد از 48 ساعت، بقاي سلول ها در غلظت هاي 25 و 50 ميكرو مولار هسپريدين بدون وجود انسولين به ترتيب 7/75±16/57% و 3/6±29/33% و در حضور انسولين به ترتيب 6/81±16/5% و 8/52±28/27% در مقايسه با گروه كنترل كاهش يافت (p<0/05). همچنين هسپريدين باعث افزايش آپوپتوز در غلظت هاي 25 و 50 ميكرومولار به ترتيب به ميزان 6 و 2/84 برابر در عدم حضور انسولين و به ميزان 5/98 و 2/17 برابر در حضور انسولين نسبت به گروه كنترل شد (p<0/05). نتيجه گيري: نتايج مطالعه حاضر تائيد كننده اثرات ضد سرطاني هسپريدين از طريق تحريك آپوپتوز و مهار رشد سلول هاي Nalm-6 در حضور و عدم حضور انسولين مي باشد. بنابراين مي توان هسپريدين را به عنوان يك عامل Chemopreventive طبيعي در كنار ساير داروهاي شيمي درماني در درمان سرطان پيشنهاد كرد.

Background and Objectives: Hesperidin is the most common flavonoid in citrus fruit and possesses anticancer proapoptotic and antiproliferative properties for some tumor cells. The present study assayed the effects of hesperidin in the presence and absence of insulin on the survival and apoptosis of Nalm-6 cells، an acute lymphoblastic leukemia cell line that is resistant to chemotherapy. Material and Methods: Nalm-6 cells were cultured in RPMI 1640 supplemented with 10% FBS and 1% penicillin and streptomycin. The cytotoxic and apoptotic effects of two concentrations of hesperidin (25 and 50 µM) in the presence or absence of insulin (100 nM) and the cytotoxic and apoptotic effects of wortmannin (10 nM) were assayed using MTT assay and the cell death detection ELISA kit، respectively. Results: Hesperidin decreased the survival rate of Nalm-6 cells in a time dependent manner. After 48 h، cell survival for the 25 and 50 µM concentrations of hesperidin decreased 16.57± 7.75% and 29.33 ± 3.6%، respectively، in the absence of insulin، and 16.5 ± 6.81% and 28.27 ± 8.52%، respectively، in the presence of insulin in comparison with the control group (p < 0.05). Hesperidin also increased apoptotic death in Nalm-6 cells at 25 and 50 µM concentrations 6 and 2.84 fold in the absence of insulin and 5.98 and 2.17 fold in the presence of insulin in comparison to the control group (p < 0.05) . Conclusions: These results indicate the anti-cancer effects of hesperidin by inducing apoptosis and inhibiting cell proliferation in Nalm-6 cells in the presence and absence of insulin. Hesperidin can be suggested as a natural chemo-preventative agent in conjunction with other chemotherapy agents in the treatment of cancer.