بررسي وجود ژن بيماري‌زاي SAP3 در سويه‌هاي كانديدا آلبيكنس جداشده از بيماران مبتلا به ولوواژينيت كانديديايي

Investigation of Presence of SAP3 Virulence Gene in Candida albicans Strains Isolated from Patients with Vulvovaginal Candidiasis

سابقه و هدف: هر ساله ميليون‌ها زن به ولوواژينيت كانديديايي (VVC: Vulvovaginal Candidiasis) مبتلا مي‌شوند كه شايع ترين عامل آن، كانديدا آلبيكنس (Candida albicans) مي‌باشد. آسپارتيل پروتئينازهاي ترشحي (SAPs: Secreted Aspartyl Proteinases) از مهم‌ترين عوامل حدت گونه‌هاي كانديدا مي‌باشند. شايان ذكر است كه آنزيم SAP3 به دليل نقش در چسبندگي كانديدا آلبيكنس در روند اوليه ايجاد عفونت ولوواژينيت اثرگذار مي‌باشد. در اين راستا، مطالعه حاضر با هدف تعيين وجود ژن بيماري‌زاي SAP3 در سويه‌هاي كانديدا آلبيكنس جداشده از بيماران مبتلا به ولوواژينيت كانديديايي انجام شد. مواد و روش‌‌ها: در اين مطالعه مقطعي 268 نمونه از ترشحات واژينال مراجعه‌كنندگان به بيمارستان اميرالمؤمنين شهر گراش (استان فارس) در شش ماهه اول سال 1397 جمع‌آوري گرديد. نمونه‌ها پس از بررسي مستقيم ميكروسكوپي بر روي محيط سابورو دكستروز آگار حاوي كلرامفنيكل (50 ميلي‌گرم بر ليتر) كشت داده شدند. در ادامه، سويه‌هاي كانديدا با استفاده از آزمون‌هاي فنوتيپي استاندارد و آزمون جذب قندها (API20C) شناسايي و تعيين هويت گرديدند. لازم به ذكر است كه DNA Deoxyribonucleic Acid ژنومي به روش فنل-كلروفرم-ايزوآميل الكل استخراج شد و براي حضور ژن SAP3 از تكنيك (Polymerase Chain Reaction (PCR استفاده گرديد. يافته‌ها: از ميان نمونه‌هاي مورد مطالعه، 79 مورد (29/47 درصد) با آزمايش مستقيم ميكروسكوپي و كشت، مثبت شدند. در اين مطالعه 48 مورد كانديدا آلبيكنس (60/75 درصد) و 31 مورد گونه‌هاي غيرآلبيكنس (39/24 درصد) شناسايي گرديد. نتايج حاصل از PCR نيز نشان‌دهنده حضور ژن SAP3 در 47 سويه‌ كانديدا آلبيكنس (97/91 درصد) بود. نتيجه‌گيري: نتايج نشان داد كه ولوواژينيت ناشي از كانديدا آلبيكنس در مقايسه با ساير گونه‌هاي كانديدا فراواني بيشتري دارد كه حضور ژن SAP3 در بيشتر سويه‌هاي كانديدا آلبيكنس مي‌تواند توجيه‌كننده اين امر باشد.

Background and Objective: Vulvovaginal Candidiasis (VVC) affect millions of women annually. Candida albicans is the most common cause of VVC. Secreted aspartyl proteinases (SAPs) are among the most important virulence factors in Candida species. The SAP3 enzyme is effective in the initial development of VVC infection due to its role in the adhesion of Candida albicans. The aim of this study was to determine the presence of SAP3 gene in Candida albicans strains isolated from patients with Vulvovaginal Candidiasis. Materials and Methods: In this cross-sectional study, vaginal secretion samples were collected from 268 vaginitis patients referred to Amiralmomenin Hospital of Gerash city, Fars province, Iran from March to August 2018. After direct microscopic examination, all samples were cultured on sabouraud dextrose agar medium with chloramphenicol (50mg/L). Candida strains were identified using standard phenotypic and sugar assimilation tests (API20C). Genomic DNA extraction and the presence of SAP3 gene were performed using chloroform-phenol-isoamyl alcohol and polymerase chain reaction (PCR) methods, respectively. Results: Out of 268 samples, 79 (29.47%) cases were positive for Candida species under direct microscopy and culture results. 48 (60.75%) and 31(39.24%) Candida albicans strains and Non-albicans candida species were isolated, respectively. The results of PCR showed the presence of SAP3 gene in 47 (97.91%) Candida albicans strains. Conclusion: It can be concluded that Candida albicans were more likely to cause Vulvovaginal than other Candida species. The explanation for this is the presence of the SAP3 gene in most Candida albicans strains.