بررسي ژن مقاومت بتالاكتاماز CTX در اشرشيا كلي جدا شده از نمونه هاي عفونت ادراري بيمارستان هاي آموزشي دانشگاه علوم پزشكي مازندران به روش واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR)

Detection of CTX beta-lactamase Gene in Escherichia Coli Isolated from Urinary Tract Infection Using Polymerase Chain Reaction

سابقه و هدف: اشرشيا كلي به عنوان پاتوژن فرصت طلب شايع در عفونت‌هاي بيمارستاني محسوب مي‌شود. مصرف روزافزون آنتي بيوتيك‌هاي بتالاكتام سبب ايجاد مقاومت آنتي‌بيوتيكي در اين باكتري شده است كه اين مقاومت معمولاً در اثر توليد آنزيم هاي بتالاكتامازي است. توليد آنزيم بتالاكتاماز در باكتري‌ها به ويژه در اشرشيا كلي مشكلات فراواني را براي درمان بيماران ايجاد نموده است. اين مطالعه به منظور تعيين الگوي مقاومت آنتي‌بيوتيكي و شيوع ژن CTX در اشرشيا كلي جدا شده از بيمارستان‌هاي آموزشي دانشگاه علوم پزشكي مازندران، شهرستان ساري انجام گرفت. مواد و روش‌ها:. در اين مطالعه توصيفي مقطعي ابتدا 200 نمونه ادراري از بخش‌هاي عفوني و نفرولوژي بيمارستان‌هاي رازي قائم شهر و امام خميني (ره) ساري گردآوري شده، پس از كشت بر روي محيط EMB آگار در دماي oC37 به مدت 24 ساعت و انجام تست‌هاي بيوشيميايي براي تاييد، از بين 200 نمونه 120 ايزوله اشرشيا كلي جدا سازي شد. براي شناسايي مولد بتالاكتاماز از روش ديسك تركيبي استفاده شد. سپس حساسيت نسبت به آنتي‌بيوتيك‌ها با روش كربي بائر تعيين شد. بررسي حضور ژن بتالاكتامازي CTX با استفاده از روش PCR انجام گرفت. يافته‌ها: از 120 سويه مورد بررسي 66 (55 درصد) سويه مولد بتالاكتامازهاي وسيع‌الطيف بوده، پس از طي پروسه PCR براي شناسايي ژن CTX مشخص گرديد از 66 سويه بتالاكتاماز وسيع الطيف مثبت،40 ايزوله (60 درصد) حاوي ژن مورد نظر بوده است. استنتاج: نتايج حاصل از اين مطالعه نشان مي‌دهد كه ژن CTX شيوع بالايي در بين ايزوله‌هاي اشرشيا كلي مولد بتالاكتامازهاي وسيع الطيف (ESBL) دارد، كه وجود اين آنزيم در باكتري با مقاومت آنتي‌بيوتيكي رابطه مستقيمي دارد. امروزه اين مسئله يكي از مشكلات بهداشتي جدي در سطح دنياست كه اقدامات لازم به جهت جلوگيري از اين مشكل الزامي است.

Background and purpose: Escherichia Coli is one of the most common pathogens associated with nosocomial infection. Increasing use of beta Lactam Antibiotics in treatment of bacterial infections resulted in increments of drug resistance of such bacteria that is caused due to the production of Blactamase enzymes. The beta lactamase – producing bacteria especially E.coli which is resistant to beta lactam antibiotics may pose great risks for patients. This study was conducted to determine the prevalence of CTX B-lactamase in E.coli isolates collected from hospitals in sari and Qaemshaher, Iran. Materials and methods: In this study, 200 urine samples were collected from nephrology and infection departments in Qaemshaher Razi and Sari Imam Khomeini hospitals. The samples were cultured on EMB agar and incubated at 37oC for 24 hours. E.coli isolates were detected in 120 samples using standard bio chemical tests. ESBL production was determined by combination disk method. Then, the susceptibility of isolates towards antibiotics was determined by standard disk diffusion method. The presence of CTX gene was determined applying PCR. Results: From 120 samples identified as Ecoli 66 (55%) were ESBLs producing strains. PCR showed that from 66 isolates 40 (60%) contained CTX gene. Conclusion: Our study showed high frequency of CTX gene in ESBL producing isolates. This indicates the role of enzyme in resistance to beta lactam containing antibiotics. This issue poses a serious harm to public and all necessary actions should be taken to prevent and control this problem.