اثر عصاره Viola odorata (گل بنفشه) بر ميزان بقاي رده سلولي MDA-MB-468 سه گانه منفي سرطان سينه

Effect of Viola odorata Extract on Cell Survival of Triple Negative Breast Cancer MDA-MB-468 Cells

سابقه و هدف: مطالعات اخير نشان داده‌اند كه تركيب اصلي گياه بنفشه (سيكلوتايدها) اثر مهاري بر تكثير سلول‌هاي سرطاني دارد. ملاتونين نيز موجب كاهش اندازه و رشد سلول‌هاي توموري مي‌شود. هدف اصلي اين مطالعه مقايسه اثر مهاري عصاره هيدروالكلي گل بنفشه و ملاتونين بر رشد سلول‌هاي MDA-MB-468 بوده است. مواد و روش‌ها: در مطالعه تجربي حاضر سلول‌هاي سه گانه منفي سرطان سينه انساني (MDA-MB-468) در پليت‌هاي 96 تايي كشت داده شدند و به مدت 24 ساعت با غلظت‌هاي مختلف از عصاره هيدروالكلي گل بنفشه و ملاتونين تيمار شدند. ميزان تكثير سلولي توسط تكنيك MTT assay مورد ارزيابي قرار گرفت. در مطالعه in vivo موش‌هاي Balb/c (6گروه 6تايي) lµ 100 از سوسپانسيون سلولي (4T1 cell) را با تزريق زيرپوستي در سمت چپ دريافت كردند. حيوانات با دوزهاي مختلف عصاره (250،150،50mg/kg ) و ملاتونين (40mg/kg) به مدت سه هفته تيمار شدند. تغييرات حجم به صورت هفتگي و تغييرات وزن در روز 21 مورد بررسي قرار گرفت. يافته‌ها: در مطالعه in vitro غلظت‌هاي مختلف عصاره (30، 40، 60، 80، 100، 150 و 200 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر) باعث كاهش معني‌داري در بقاي سلولي شدند (p<0/05). غلظت 1 ميلي‌مولار ملاتونين نيز موجب كاهش معني‌داري در بقاي سلول‌هاي سرطاني شد (p<0/05). در مطالعه in vivo دوز 250mg/kg عصاره و 40mg/kg ملاتونين، افزايش حجم تومور در مقايسه با گروه كنترل را در روز 21 تيمار مهار كرد. استنتاج: تيمار ملاتونين و عصاره موجب كاهش چشمگيري در بقاي سلولي و حجم تومور مي‌شود.

Background and purpose: Recently studies have shown that main compound (Cyclotides) of Viola odorata has an inhibitory effect against proliferation of cancer cells. Also, melatonin reduces size and growth of tumor cells. The main purpose of this study was to compare the inhibitory effect of Viola odorata and melatonin on MDA-MB-468 cells proliferation. Materials and methods: In this exprimental study, triple negative human breast cancer cells (MDA-MB-468) were cultured in 96-well plates and incubated with different concentrations of Viola odorata hydroalcoholic extract and melatonin for 24h. Cell viability was measured using MTT assay. In the in vivo study Balb/c mice (6 group, n=6) received subcutaneous injection of 100 μl of cell suspension (4T1 cells) in the left hind flank. The animals were treated with different concentrations of Viola odorata extract (50, 150, 250, and mg/kg) and melatonin (40 mg/kg) for three weeks. Tumor volume changes were measured weekly and weight changes were measured at day 21. Results: The in vitro study showed that different concentrations (30, 40, 60, 80,100,150, and 200 μg/ml) of Viola odorata significantly decreased cell survival in cancer cells (P<0.05). Also, melatonin at concentration of 1mM significantly decreased cell viability (P<0.05). The in vivo study found that melatonin (40 mg/kg) and Viola odorata at 250 mg/ml concentration inhibited increasing of tumor volume after 21 days compared with control group. Conclusion: Treatment with melatonin and Viola odorata extract was found effective in reducing cell survival and tumor volume.