مقايسه پتانسيل كندروژنز سلول هاي بنيادي مشتق از بافت چربي انساني در دو سيستم كشت تك لايه و ريز توده

Comparing the Chondrogenesis Potential of Human Adiposederived Stem Cells in Monolayer and Micromass Culture Systems

سابقه و هدف: بيماري‌هاي غضروف مفصلي در همه‌ي جوامع شيوع فراواني دارد و در اكثر موارد غضروف آسيب ديده قادر به ترميم نمي‌باشد. روش‌هاي درماني حمايتي با مشكلات زيادي همراه است. بنابراين سلول درماني به‌عنوان درمان قطعي مورد نياز مي‌باشد. يكي از بهترين و در دسترس‌ترين منابع سلولي، سلول‌هاي بنيادي مشتق از بافت چربي است كه با تكنيك‌هاي مهندسي بافت به سلول‌هاي غضروفي تمايز مي‌يابد. روش كشت سلول در تمايز غضروفي نقش كليدي دارد. هدف از اين مطالعه مقايسه پتانسيل كندروژنز سلول‌هاي بنيادي مشتق از بافت چربي انساني در دو سيستم كشت تك لايه و ريز توده بود. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه تجربي سلول‌هاي بنيادي از بافت چربي زير جلدي جدا شدند. سلول‌هاي بنيادي مشتق از بافت چربي در دوروش كشت سه بعدي (ريز توده) و تك لايه‌اي با محيط تمايزي كندروژنيك براي 14 روز كشت داده شدند. مورفولوژي سلول‌ها با استفاده از ميكروسكوپ معكوس مشاهده شد. تمايز كندروژنيك با دو روش هيستولوژيكي و ايمونوسيتوشيمي ارزيابي شد. يافته‌ها: نتايج نشان داد در سيستم كشت ريز توده، ميزان سنتز پروتئين كلاژن نوع 2 بيش‌تر بود. همچنين گليكوزآمينوگليكان بيش‌تري در ماتريكس خارج سلولي ترشح شد. استنتاج: با توجه به نتايج اين مطالعه مي‌توان گفت كه سيستم كشت ريز توده (Micromass) شرايط مناسب‌تري براي تمايز كندروژنيك نسبت به كشت تك لايه‌اي (Monolayer) دارد.

Background and purpose: Articular cartilage disease is prevalent in all societies and in most cases the damaged cartilage would not repair. Conservative treatments are associated with many problems. So cell therapy is needed as a definite treatment. One of the best and most accessible sources of cells for this purpose is stem cells derived from adipose tissue which can be differentiated into chondrocytes by tissue engineering techniques. Cell culture method has a key role in chondrogenic differentiation. In this study, two different culture methods (monolayer and micromass) were compared. Materials and methods: In this descriptive study, stem cells were isolated from subcutaneous abdominal adipose tissue. Adipose-derived stem cells (ADSCs) were cultured by micromass and monolayer culture methods in chondrogenic differentiation medium for 14 days. The morphology of cells was observed using an inverted microscope. Chondrogenic differentiation was evaluated by histology and immunocytochemistry methods. Results: The results revealed that micromass culture system increased the protein synthesis of collagen II and deposition of glycosaminoglycan in extracellular matrix. Conclusion: This study suggests that the micromass culture system is a suitable condition for chondrogenic differentiation compared to monolayer cell culture.