رديابي گونه هاي فوزاريوم مولد مايكوتوكسين با استفاده از صفات ريخت شناسي و مولكولي در دانه ذرت

Detection of Mycotoxins Producing of Fusarium Species Using Morphological and Molecular Characteristics in Corn

قارچ فوزاريوم از بيمارگرهاي عمده­ي مزارع ذرت محسوب مي­شود كه علاوه بر تقليل كميت و كيفيت محصول، با توليد چند نوع مايكوتوكسين از جمله فومونيزين (FUM)، موجب آلودگي مواد غذايي و تهديد سلامت انسان و دام مي­شود. در تحقيق حاضر نمونه­برداري از دانه­هاي ذرت داراي علائم بيماري قارچي موجود در سيلوهاي دامداري و مرغداري­هاي مختلف استان خراسان رضوي انجام گرفت. با كشت دانه هاي ذرت بر روي محيط كشت هاي PDA و WA، پس از جداسازي و خالص سازي جدايه­هاي متعلق به جنس فوزاريوم، مجموعأ تعداد 40 جدايه بدست آمده كه با توجه به ويژگي­هاي ماكروسكوپيك و ميكروسكوپيك آنها و مقايسه با كليدهاي شناسايي مربوطه، سه گونه Fusarium verticillioides، F. graminearum و F. proliferatum به ترتيب با فراواني 34، 4 و 2 جدايه شناسايي شدند. به منظور تأييد نتايج بدست آمده، پس از استخراج DNA جدايه­ها و دانه­هاي ذرت با استفاده از واكنش PCR و آغازگرهاي اختصاصي توالي مورد نظر تكثير شد. بعلاوه، با استفاده از واكنش PCR به همراه آغازگر اختصاصي (FUM1 F/R) 15 جدايه از گونه­ي غالب F.verticillioides از نظر پتانسيل توليد فومونيزين مورد بررسي قرار گرفتند. در محصولات PCR، توليد نوارهاي bp183 براي 15 جدايه مزبور مشاهده گرديد. نتايج حاصل از اين مطالعه نشان داد كه همه­ي جدايه هاي مورد بررسي گونه­ي F. verticillioidesاز نظر ژنتيكي از پتانسيل توليد فومونيزين برخوردار هستند، همچنين با تكنيك مبتني بر PCR و نشانگرهاي مولكولي بكار رفته در اين مطالعه، شناسايي، تفكيك و رديابي گونه­هاي فوزاريوم همراه دانه­ي ذرت مقدور مي­باشد.

Fusarium, a phytopathogenic fungus in fields of corn, not only reduces the quality and quantity of crops but also causes food contamination and endangers people ̓ s health by producing some mycotoxins such as Fumonisin (FUM). In the present study, samples were collected from fungal disease symptoms-showing corn from different livestock and poultry storage in Khorasan-Razavi province. Having placed the corn on PDA and WA, isolates belonging to Fusarium genus were isolated and purified. As a result, a total of 40 isolates were obtained among which three species were identified as Fusarium verticillioides, F. graminearum and F. proliferatum with isolated frequencies of 34, 4 and 2, respectively. To support these results, DNA was extracted from the isolates from corn seeds and the fungal ribosomal DNA was amplified using PCR with species- specific primers. In addition, using PCR with the specific primers (FUM1 F/R) 15 isolates of F. verticillioides, as the prevalent species were examined for fumonisin production. The results indicated that all of the examined F. verticllioides isolates gave the expected fragment with 183 bp in size. Therefore, this study demonstrated that F. verticllioides isolates genetically have a potential for fumonisin-production. It also showed that the PCR-based technique can be used for the identification, distinction and detection of the Fusarium species