تكثير هم دماي وابسته به حلقه: يك روش نوين براي تكثير DNA و RNA

Loop mediated isothermal amplification: a novel detection for amplification of DNA and RNA

تشخيص بيماري يك امر حياتي در تصميم­ گيري­ هاي درماني مناسب است. درگذشته، تشخيص براساس جداسازي و شناسايي عامل بيماري­زا بود كه توسعه آزمون­هاي سرولوژيكي را در طول زمان درپي داشت. امروزه، آزمون­هاي مولكولي با حساسيت بالا مانند واكنش زنجيره­اي پليمراز (PCR) و انواع آن، جايگزين روش­هاي تشخيصي قديمي­تر شده­اند. مانع اصلي در استفاده از روش­هاي مبتني بر PCR نياز به ترموسايكلر است كه سيستم تكثير هم­دمايي مانند آزمون تكثير هم­دماي به واسطه حلقه (LAMP) يك جايگزين خوب براي آن است. LAMP، به واسطه منحصربه فرد بودنش، تبديل به يك ابزار تشخيص مولكولي قدرتمند در دنيا شده است. اين روش جديد تكثير ژن، اسيدنوكلئيك را با سرعت، حساسيت، اختصاصيت و كارايي بالا تكثير مي­كند. از ويژگي­هاي مهم LAMP، سادگي دستورالعمل و هزينه پايين انجام آن است. از برجسته ­ترين ويژگي­ هاي اين روش، فعاليت آنزيم­هاي BST و BSM پليمراز با خاصيت جايگزيني رشته است، كه تكثير ژن در نمونه­ هاي فرآوري نشده را فراهم مي­سازد. هزينه پايين و كاربردوستي در ميان ديگر مزيت­هاي LAMP، آن را به يك ابزار تشخيصي ايده­آل براي حل مشكلات روش PCR و امثال آن تبديل كرده است و امتيازات برجسته آن در پژوهش­هاي مختلف، منجر به تغييراتي در اين روش شده است. تا امروز، انواعي از آزمون­هاي LAMP براي تشخيص تعداد زيادي از بيماري­ها از جمله بيماري­هاي باكتريايي، قارچي، ويروسي و انگلي توسعه يافته ­اند.

Disease diagnosis is of crucial importance in making appropriate therapeutic decisions. Conventionally, diagnosis was based on isolation and identification of the causative agent that was followed in timeline by the development of serological tests. Nowadays, molecular tests credited with high sensitivity like polymerase chain reaction (PCR) and its variants are replacing the older diagnostic techniques. Major obstacle in adoption of PCR based technique is the need for thermocycler and isothermal amplification system like Loop mediated isothermal amplification (LAMP) test is a good alternative for it. LAMP, through its uniqueness has provided the world with a powerful molecular diagnostic tool. This innovative gene amplification technique, amplifies nucleic acid at a very rapid pace, maintaining high sensitivity, specificity and efficiency. The most innovative features of LAMP, is the simplicity of its protocol, and over all low cost of application. The standout features however, ranges from the strand displacement activity of the Bst and Bsm polymerase enzymes, to its ability to amplify gene in an unprocessed samples. The cheapness and user-friendliness of LAMP amongst other advantages made it an ideal diagnostic tool that provides solution to the odds of PCR and its likes, the outstanding qualities displayed by LAMP in various researches, have led to several modifications in the technique. Till date, LAMP tests have been developed for diagnosis of a large number of diseases including bacterial, fungal, viral, and parasitic diseases.