كنترل بيولوژيك كپك خاكستري سيب با استفاده از تركيب چند جدايه مخمر و باكتري Bacillus subtillis و القاي پاسخ هاي دفاعي

Biological control of gray mold on apple by combining of some yeast and Bacillus subtilis isolates and induction of defense responses

دو جدايه مخمر A5 وA4 از گونهCandida membranifuciens و جدايهA6 از گونهPichia guilliermondii همچنين دو جدايه باكتري B2 و B6 از گونهBacillus subtilis براي كنترل بيماري كپك خاكستري سيب با عامل Pers.:Fr.Botrytis cinerea به صورت انفرادي و مخلوط مورد ارزيابي قرار گرفتند. آزمايش سازگاري مواد بيوكنترل با استفاده از آزمون توليد تركيبات خارج سلولي به روش سلوفان و كشت همزمان دو آنتاگونيست در محيط كشت جامد نشان داد، جدايه هاي مخمر با باكتري سازگار مي­باشند. آزمايش بررسي تقابل آنتاگونيست­ها در محيط كشت مايع ثابت كرد جمعيت جدايه­ هاي مخمر در حضور جدايه­ هاي باكتري به­خوبي تا انتهاي آزمايش مشابه كاربرد انفرادي رشد مي­كنند. نتايج آزمايشات در شرايط انبار نيز نشان داد مخلوط هايB2+A5 وB6+A6 با قطر لكه برابر با 5/23 و 7/43 ميلي­متر در دماي 20 درجه سلسيوس و همچنين در دماي 4 درجه سلسيوس بترتيب با ايجاد قطر لكه معادل3/48 و 3/87 ميلي متر، بيشترين كنترل كنندگي را نسبت به ديگر آنتاگونيست ها و مخلوط آن ها دارند. توانايي مخلوط آنتاگونيستي B2+A5 در القاي پاسخ­هاي دفاعي در بافت ميوه سيب نشان داد اين مخلوط دو روز بعد از مايه ­زني سبب افزايش فعاليت آنزيم پراكسيداز و تركيبات فنلي مي­شود علاوه بر آن، اين مخلوط چهار روز پس از مايه­زني عامل بيماري فعاليت آنزيم كاتالاز را كاهش مي­دهد. مطابق نتايج اين پژوهش مخلوط عوامل آنتاگونيست­ با افزايش القاي مقاومت در ميوه سيب، سبب بهبود بيوكنترل مي­گردند.

The biocontrol agents Candida membranifuciens (isolates A4 and A5), Pichia guilliermondi (A6) and Bacillus subtilis (B2 and B6) were tested both individually and in combination for biological control of the grey mold in fruit apple caused by Botrytis cinerea Pers.:Fr. Regarding the compatibility of the biocontrol agents, it showed that antagonists were compatible with each other according to in vitro antibiosis and cell-free metabolite by applying cellophane test. The interaction of the antagonists in liquid media showed that the growth of yeast isolates was not affected by the presence of B. subtilis isolates, and then the yeast population increased until the end of the experiment. Results of storage experiments of yeast, bacteria and their mixture indicated that the lesion diameters caused by the biocontrol agents combinations of B2+A5 and B6+A6 treated fruit were 5.23 and7.43mm, respectively, at 20 C° and 3.48 and 3.87 mm for 4 oC respectively, that provided better control than the antagonist alone. The combination of B2+A5 caused an increase in peroxidase activity and phenolic accumulation showing a maximum level 2 day after pathogen inoculation. This combination decreased catalase activities 4 day after pathogen inoculation. These results indicated that by using antagonist mixtures, it is possible to further of induction of resistance in apple fruits and improving biological control.